益智聪明汤对记忆力减退模型大鼠学习记忆的干预作用研究

发布时间：2018-11-15 20:58

【摘要】：目的:观察以开窍化痰,醒神益智立法组方的中药复方益智聪明汤对东莨菪碱模型大鼠学习记忆能力的影响,并对其相关作用机制作初步探讨。方法:选择SD大鼠80只,雌雄各半,体重控制在180-220 g,通过行为学试验(穿梭箱试验和Morris水迷宫)筛选智力相当,淘汰反应过于迟钝的大鼠,剩余70只,随机分为空白对照组,模型对照组,西药对照组,益智聪明汤低剂量组,益智聪明汤中剂量组、益智聪明汤高剂量组及中药对照组7组。空白对照组和模型对照组大鼠给予生理盐水灌胃(1ml/100g),西药对照组用脑复康溶液(0.4 g/kg)进行灌胃,益智聪明汤低剂量组(10 g/kg),益智聪明汤中剂量组(20 g/kg)、模型益智聪明汤高剂量组(40 g/kg)、中药对照组(归脾丸)(0.25g/kg),各组根据体重计算灌胃量,连续28天。在第23天开始增加造模与行为学试验,连续6天。行为学实验前半小时,采用东莨菪碱注射,造成记忆障碍模型。模型对照组,西药对照组,益智聪明汤低剂量组,益智聪明汤中剂量组、益智聪明汤高剂量组及中药对照组腹腔注射东莨菪碱注射液(2.0 mg/kg),空白对照组注射相应剂量生理盐水,腹腔注射造模药半小时后进行行为学实验测试(穿梭箱、Morris水迷宫)测定大鼠学习记忆能力,第28天实验完成后取材(血、海马组织)。用酶联免疫吸附法检测血清超氧化物歧化酶SOD含量、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性、丙二醛MDA含量;q RT-PCR法检测海马组织的bax基因、bcl-2基因表达;免疫组化法检测海马组织中的胶质纤维酸性蛋白GFAP、脑源性神经营养因子BDNF表达。结果:1.据Morris水迷宫和穿梭箱实验数据结果发现,与空白对照组比较,模型对照组平均潜伏期比正常组明显延长(P0.05);大鼠反应迟钝,被电击时间明显延长(P0.05),提示记忆障碍模型成功。2.治疗后,益智聪明汤中、高剂量、西药对照组平均潜伏期较模型对照组显著减少,有显著性统计学差异(P0.05)。中药对照组与模型对照组比较,平均潜伏期显著减少,也有显著性差异(P0.05)。穿梭箱实验显示,益智聪明汤中、高剂量组大鼠反应活跃,与模型对照组比较,受电击时间被动逃避时间明显减少,有显著性差异(P0.05)。3.与空白对照组比较,模型对照组的大鼠血清中SOD含量降低(P0.05),MDA的含量升高(P0.05),GSH-Px活性明显降低,有显著性差异(P0.05);与模型对照组相比,益智聪明汤中、高剂量组大鼠血清中的SOD含量明显提高(P0.05),MDA的含量降低(P0.05);GSH-Px活性明显提高,有显著性差异(P0.05)。4.与空白对照组比较,模型对照组的大鼠海马组织Bax m RNA的表达显著升高(P0.05),Bcl-2 m RNA的表达下降,有显著性差异(P0.05);与模型对照组相比,益智聪明汤中、高剂量组大鼠海马组织Bax m RNA的表达显著降低(P0.05),Bcl-2 m RNA的表达升高,有显著性差异(P0.05)。5.与空白对照组比较,模型对照组的大鼠海马组织GFAP阳性表达升高(P0.05),BDNF阳性表达降低,有显著性差异(P0.05);与模型对照组相比,益智聪明汤中、高剂量组大鼠海马组织GFAP阳性表达降低(P0.05),BDNF阳性表达升高,有显著性差异(P0.05)。结论:1.用东莨菪碱注射法制造记忆障碍大鼠模型,其用药后更接近模拟大鼠记忆障碍的表现状态,是一种可靠的动物模型。2.益智聪明汤可以提高记忆障碍大鼠的学习和记忆能力,其作用机制可能与提高大鼠血清SOD含量,降低MDA的含量,提高GSH-Px活性,机体抗氧化能力增强,自由基减少,保护脑神经递质,使脑组织的氧化应激损伤减轻,延缓脑衰老进程,使大脑的学习记忆能力改善。3.益智聪明汤可以提高记忆障碍大鼠的学习和记忆能力,可能与提高BDNF阳性表达,降低GFAP的表达,降低Bax m RNA的表达,提高Bcl-2 m RNA的表达,减少大鼠海马细胞凋亡有关。
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【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R-332

【参考文献】