蛋白激酶MPK-1通过DAF-16调控FAT-7抑制脂质累积

发布时间：2018-12-13 07:20

【摘要】：目的探讨蛋白激酶MPK-1对脂质代谢的影响及可能的作用机制。方法用秀丽线虫(C.elegans)作为模式生物,采用RNA干扰(RNAi)技术定向干扰mpk-1,sbp-1、daf-2基因表达,油红O和苏丹黑染色观察线虫脂质含量的变化,洗脱脂肪进行定量分析确定脂肪含量的增减。采用RNAi技术结合对线虫体内特定位置绿色荧光蛋白表达变化的观察,分析MPK-1影响脂肪累积的可能机制。结果干扰mpk-1基因表达后,线虫体内脂肪含量明显增加。荧光显微镜观察发现:脂质合成酶fat-7∷gfp线虫干扰mpk-1基因表达后,荧光增强;表达调控fat-7的转录因子DAF-16荧光蛋白的线虫品系中干扰mpk-1基因表达,可促进DAF-16向核内转移。结论蛋白激酶MPK-1可能通过DAF-16调控FAT-7的活性,抑制脂肪的合成代谢,减少脂质累积。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of protein kinase MPK-1 on lipid metabolism and its possible mechanism. Methods using C.elegans as model organism, RNA interference (RNAi) technique was used to directly interfere mpk-1,sbp-1,daf-2 gene expression. Oil red O and Sudan black staining were used to observe the change of nematode lipid content. The content of fat was determined by quantitative analysis. The changes of green fluorescent protein (GFP) expression in nematodes were observed by RNAi technique. The possible mechanism of MPK-1 affecting fat accumulation was analyzed. Results after interfering with the expression of mpk-1 gene, the fat content of nematodes increased significantly. Fluorescence microscopy showed that fat-7: gfp nematode interfered with the expression of mpk-1 gene, and the fluorescence increased. Interfering with the expression of mpk-1 gene in nematode strains which express DAF-16 fluorescent protein, the transcription factor of fat-7, can promote the transfer of DAF-16 into nucleus. Conclusion protein kinase MPK-1 may regulate the activity of FAT-7 through DAF-16, inhibit the metabolism of fat and decrease the accumulation of lipid.
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属瑞金医院分子医学中心;
【分类号】：R363

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本文编号：2376139