慢病毒负载GFP转染兔脂肪干细胞的效率及毒性评价

发布时间：2018-12-30 21:47

【摘要】：目的探讨慢病毒负载绿色荧光蛋白(GFP)对兔脂肪干细胞(rADSCs)转染的可行性及稳定性,为rADSCs组织工程化角膜上皮的研究提供可靠的体内外示踪方法。方法以慢病毒作为载体,采用不同感染复数(MOI)慢病毒将GFP基因导入rADSCs,荧光倒置显微镜下观察细胞转染情况,应用MTT法检测慢病毒转染对rADSCs细胞生长的影响,评价细胞毒性。结果当MOI值为50、100、500时,rADSCs均可被成功转染,120 h后转染效率均可达50%以上。当MOI值为50、100时,GFP-慢病毒对rADSCs的生长无明显影响,而MOI值为500时,细胞生长受到明显抑制。结论慢病毒负载GFP可成功导入rADSCs,为进一步对ADSCs组织工程化角膜上皮的研究奠定了良好的实验基础。
[Abstract]:Objective to investigate the feasibility and stability of lentivirus loaded green fluorescent protein (GFP) on (rADSCs) transfection of rabbit adipose stem cells and to provide a reliable in vitro and in vivo tracer for the study of rADSCs tissue engineered corneal epithelium. Methods Lentivirus was used as vector and GFP gene was transfected into rADSCs, by using different complex (MOI) lentivirus. The effect of lentivirus transfection on the growth of rADSCs cells was detected by MTT assay. To evaluate cytotoxicity. Results when the MOI value was 50100,500, the rADSCs could be transfected successfully, and the transfection efficiency could reach more than 50% after 120 h. When the MOI value was 50100, GFP- lentivirus had no obvious effect on the growth of rADSCs, but when MOI value was 500, cell growth was significantly inhibited. Conclusion Lentivirus-loaded GFP can be successfully introduced into rADSCs, to lay a good experimental foundation for further study of ADSCs tissue engineered corneal epithelium.
【作者单位】： 上海交通大学附属第六人民医院眼科;上海交通大学基础医学院组织胚胎学教研室;上海市生殖医学重点实验室;
【分类号】：R329

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2396198