RACK1通过靶定VISA负调控RLR-VISA抗病毒信号通路
发布时间：2020-06-04 04:09
【摘要】：先天免疫是保护宿主细胞远离病原微生物的第一道防线。目前已知三种模式识别受体PRRs(pattern recognition receptors)能识别微生物及病毒组分,包括NLRs(NOD like receptors)、RLRs(RIG-I like receptors)和TLRs(Toll like receptors)。其中,RLRs是识别病毒RNA的重要胞浆受体。病毒感染细胞后,RIG-I(retinoic acid-induced gene I)识别病毒RNA,导致RIG-I受体自身构象变化而活化,活化的RIG-I结合下游重要的接头蛋白VISA(Virus-induced signaling adaptor),转导下游的抗病毒先天免疫信号。VISA一方面可以通过激活IKKα/β/γ(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinaseα/β/γ)来介导NF-κB(nuclear factor kappa B)的激活,另一方面通过自身的TRAF结合域,与转位到线粒体上的TRAF(tumor necrosis factor receptor-associated factor)蛋白结合形成VISA-TRAF复合物,随后招募TBK1(TANK-binding kinase 1)和IKKε(IkB kinase-ε)来促进IRF3(interferon regulatory factor 3)和IRF7(interferon regulatory factor 7)的磷酸化。磷酸化的IRF3和IRF7因为自身的同源二聚化作用转位进入细胞核并分别与IFN-β(interferon-β)和IFN-α(interferon-α)的启动子特定区域结合来激起I型干扰素表达。VISA介导的I型干扰素产生在抗病毒先天免疫中起至关重要的作用,但是关于VISA介导的抗病毒调控仍有许多未知之处。我们的研究证实在293T细胞中过表达RACK1能够抑制RIG-I、VISA和TBK1介导的IRF3转录因子活化,抑制仙台病毒诱导的IFN-β启动子、ISRE及NF-κB的激活。而siRNA敲减RACK1的表达增强RIG-I/VISA介导和病毒诱导的这种抗病毒信号转导。免疫共沉淀实验结果显示,RACK1特异性地与VISA相互作用,过表达RACK1遏制VISA-TRAF2、VISA-TRAF3和VISA-TRAF6复合物的形成。进一步研究发现,RACK1能增强VISA K48-linked泛素化,减弱其K63-linked泛素化,负调控VISA介导的抗病毒信号转导。这些结果共同表明,RACK1通过与VISA相互作用,调节VISA的泛素化修饰,阻碍VISA招募下游不同TRAF蛋白,抑制病毒诱导的转录因子IRF3的活化,负调控病毒诱导的I型干扰素IFN-β的产生。
【图文】：
故而命名为视黄酸诱导基因 Ⅰ，只是当时人们并没有发现其具备识别病毒双链 RNA 的功能，直到后来，日本的研究者阐明了 RIG-I 的结构，研究证实 RIG-I 是一个胞质受体，能够激活 I 型干扰素的产生。RIG-I 蛋白全长由 925 个氨基酸组成，C 端是 RNA 结合结构域 (C-terminal domain，CTD)和抑制结构域 (repressor domain，RD)，N 端有两个 CARD 结构域，中间是DECH-box 解旋酶结构域 (见图 1-1)。无病毒感染状态下，DECH-box 解旋酶结构域被掩盖而没有活性。在无病毒 dsRNA 激活的情况下，RIG-I 样受体中串联的 CARD 域与其解旋酶结构域和 CTD 接触，维持 RIG-I 的自动抑制状态，这种构象在空间上阻止 CARD 与多聚泛素蛋白或其他分子结合。当细胞受到病毒感染后，，RIG-I 的 CTD 将识别并结合病毒 RNA, 导致 RIG-I 空间构象发生改变，使 DECH-box 解旋酶结构域暴露，从而结合并水解 ATP, 增强RIG-I 结合病毒 RNA 的能力。同时，RIG-I 发生二聚化或寡聚化使活化的CARD 结构域发挥效应，与同型结构域产生相互作用招募下游接头蛋白激活信号转导[17]。
硕士学位论文能相类似，能够诱导 I 型干扰素的产生。但不同的是，RIG-I 的 C 端的 735 到925 位氨基酸序列部分是 RD 区域，在没有病毒的情况下抑制 RIG-I 的激活，而 MDA5 的 C 端没有这段抑制功能的区间[19]。LGP2 全长有 678 个氨基酸，结构上来看，它完全没有 CARD 结构域，只有 RNA 解旋酶结构域和 RNA 结合结构域。一般认为，LGP2 能显著负调控 RIG-I/MDA5 介导的免疫反应，但是关于 LGP2 是识别病毒入侵的研究仍旧较少，相关功能也有待进一步研究[20]。
【学位授予单位】：江西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R392
本文编号：2695870
【图文】：
故而命名为视黄酸诱导基因 Ⅰ，只是当时人们并没有发现其具备识别病毒双链 RNA 的功能，直到后来，日本的研究者阐明了 RIG-I 的结构，研究证实 RIG-I 是一个胞质受体，能够激活 I 型干扰素的产生。RIG-I 蛋白全长由 925 个氨基酸组成，C 端是 RNA 结合结构域 (C-terminal domain，CTD)和抑制结构域 (repressor domain，RD)，N 端有两个 CARD 结构域，中间是DECH-box 解旋酶结构域 (见图 1-1)。无病毒感染状态下，DECH-box 解旋酶结构域被掩盖而没有活性。在无病毒 dsRNA 激活的情况下，RIG-I 样受体中串联的 CARD 域与其解旋酶结构域和 CTD 接触，维持 RIG-I 的自动抑制状态，这种构象在空间上阻止 CARD 与多聚泛素蛋白或其他分子结合。当细胞受到病毒感染后，，RIG-I 的 CTD 将识别并结合病毒 RNA, 导致 RIG-I 空间构象发生改变，使 DECH-box 解旋酶结构域暴露，从而结合并水解 ATP, 增强RIG-I 结合病毒 RNA 的能力。同时，RIG-I 发生二聚化或寡聚化使活化的CARD 结构域发挥效应，与同型结构域产生相互作用招募下游接头蛋白激活信号转导[17]。
硕士学位论文能相类似，能够诱导 I 型干扰素的产生。但不同的是，RIG-I 的 C 端的 735 到925 位氨基酸序列部分是 RD 区域，在没有病毒的情况下抑制 RIG-I 的激活，而 MDA5 的 C 端没有这段抑制功能的区间[19]。LGP2 全长有 678 个氨基酸，结构上来看，它完全没有 CARD 结构域，只有 RNA 解旋酶结构域和 RNA 结合结构域。一般认为，LGP2 能显著负调控 RIG-I/MDA5 介导的免疫反应，但是关于 LGP2 是识别病毒入侵的研究仍旧较少，相关功能也有待进一步研究[20]。
【学位授予单位】：江西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R392
【相似文献】
相关硕士学位论文 前2条
1 谢韬;RACK1通过靶定VISA负调控RLR-VISA抗病毒信号通路[D];江西师范大学;2019年
2 何天生;HAUS8通过靶定VISA正调控RLR-VISA抗病毒信号通路[D];江西师范大学;2017年
本文编号：2695870
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/2695870.html
