17β-雌二醇通过GPER受体减小心室肌细胞晚钠电流和反向钠钙交换电流

发布时间：2017-03-30 10:03

  本文关键词：17β-雌二醇通过GPER受体减小心室肌细胞晚钠电流和反向钠钙交换电流，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：17β-雌二醇(E2)可以影响多种心肌细胞离子流，平衡细胞内外多种离子浓度，然而其对晚钠电流(INa.L)的影响尚未见报道。本实验采用全细胞膜片钳技术探究E2对家兔心室肌细胞正常、H2O2增大及ATX（晚钠通道开放剂）增大的INa.L和反向钠钙交换电流(反向INCX)的作用。结果表明，E2可以浓度依赖性地减小正常的INa.L和反向INCX；10nM ATX和300μM H2O2可以显著增大心室肌细胞的INa.L和反向INCX，这种增大作用可以被100nM E2所抑制；电极内液中加入cAMP抑制剂H-89或PI3K抑制剂wortmannin，E2仍能减小INa.L；G蛋白耦联的雌激素受体（GPER）激动剂G-1具有与E2类似的作用，可以浓度依赖性地减小正常的INa.L和反向INCX，也可减小10nM ATX和300μM H2O2增大的INa.L和反向INCX；GPER受体拮抗剂G15（40nM）存在条件下加入1000nM E2，INa.L无明显变化（P0.05vs40nM G15）。结论：E2通过GPER受体减小心室肌细胞正常以及ATX和H2O2增大的INa.L和反向INCX，，并且此种作用可能与cAMP和PI3K途径没有直接关系。
【关键词】：17β-雌二醇 G-1 G15 晚钠电流 反向钠钙交换电流 膜片钳
【学位授予单位】：武汉科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第一部分9-34
• 中文部分9-21
• 前言9
• 1 材料方法9-11
• 1.1 家兔心室肌细胞的分离9-10
• 1.2 药品和试剂10
• 1.3 电流的记录10-11
• 1.4 数据分析11
• 2 结果11-19
• 2.1 E_2对 INa.L和反向 INCX的作用11-12
• 2.2 E_2对 H_2O_2增大的 INa.L和反向 INCX电流的作用12-13
• 2.3 E_2对 ATX 增大的 INa.L和反向 INCX电流的作用13-14
• 2.4 G-1 对 INa.L和反向 INCX的作用14-15
• 2.5 G-1 对 H_2O_2增大的 INa.L和反向 INCX的作用15-16
• 2.6 G-1 对 ATX 增大的 INa.L和反向 INCX的作用16-17
• 2.7 H-89 和 wortmannin 对 INa.L的作用17-18
• 2.8 G15 对 INa.L的作用18-19
• 3 讨论19-21
• 英文部分21-29
• Abstract21
• Introduction21-22
• 1 Materials and methods22-24
• 1.1 Isolation of rabbit ventricular myocytes22-23
• 1.2 Drugs and reagents23
• 1.3 Current recordings23-24
• 1.4 Data analysis24
• 2 Results24-26
• 2.1 Effects of E_2 on INa.Land reverse INCX24-25
• 2.2 Effects of E_2 on H_2O_2-increased INa.Land reverse INCX25
• 2.3 Effects of E_2 on ATX-increased INa.Land reverse INCX25
• 2.4 Effects of G-1 on INa.Land reverse INCX25
• 2.5 Effects of G-1 on H_2O_2-increased INa.Land reverse INCX25-26
• 2.6 Effects of G-1 on ATX-enlarged INa.Land reverse INCX26
• 2.7 Effects of H-89 and wortmannin on INa.L26
• 2.8 Effects of G15 on INa.L26
• 3 Discussion26-29
• References29-34
• 第二部分34-57
• 中文部分34-45
• 摘要34
• 前言34-35
• 1 材料方法35-37
• 1.1 伦理审批35
• 1.2 心室肌细胞的分离35
• 1.3 液体和药品35-36
• 1.4 电流记录36
• 1.5 细胞收缩36-37
• 1.6 胞内钙荧光测量37
• 1.7 数据分析37
• 2 结果37-43
• 2.1 哇巴因浓度依赖性地增大 INa.L和反向 INCX37-40
• 2.2 PKC 抑制剂 BIM 浓度依赖性地减小哇巴因增大的晚钠电流和反向钠钙交换电流40-41
• 2.3 CaMKII 阻断剂 KN-93，可以减小哇巴因增大的 INa.L和反向 INCX，其无效类似物 KN-92 无此作用41-42
• 2.4 TTX 可以逆转哇巴因增大的钙瞬变和心室肌细胞收缩力的增强42-43
• 3 讨论43-45
• 英文部分45-53
• Abstract45-46
• Introduction46-47
• 1 Methods47-49
• 1.1 Ethical approval47
• 1.2 Isolation of ventricular myocytes47
• 1.3 Solutions and drugs47-48
• 1.4 Electrophysiological recordings48
• 1.5 Cell Shortening/Relengthening48-49
• 1.6 Intracellular Ca2+Fluorescence Measurement49
• 1.7 Statistical analyses49
• 2 Results49-51
• 2.1 Ouabain concentration-dependently increased INa.Land reverse INCX49-50
• 2.2 The PKC inhibitor BIM concentration-dependently attenuated the ouabain-induced increases of INa.Land reverse INCX50
• 2.3 The CaMKII inhibitor KN-93, but not its inactive analog KN-92, attenuated the effects of ouabain to increase INa.Land reverse INCX50-51
• 2.4 Ouabain-induced increases of calcium transients and contractile shortening of ventricular myocytes could be reversed by TTX51
• 3 Discussion51-53
• References53-57
• 致谢57-58
• 附录 1 攻读硕士学位期间发表的论文58-59
• 附录 2 攻读硕士学位期间参加的科研项目59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 马季骅;罗岸涛;王伟平;张培华;;细胞外pH值降低可增强豚鼠心室肌细胞持续性钠电流[J];生理学报;2007年02期

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本文编号：276824