亚洲带绦虫实验感染乳猪肝脏的转录组研究

发布时间：2020-10-26 16:41

　　 目的:本研究旨在分析亚洲带绦虫实验感染乳猪后被囊尾蚴寄生的乳猪肝脏转录组表达变化,为探讨亚洲带绦虫与中间宿主相互作用的可能分子机制提供基础资料。方法:将采自贵州省都匀市良亩乡的亚洲带绦虫孕节解剖后,以生理盐水反复清洗并离心收集虫卵。20日龄约克施格杂交乳猪12头随机分为实验组和对照组各6头,实验组以定量15万个虫卵/头灌胃感染,于感染后第15天和第75天解剖乳猪,取实验组囊尾蚴寄生的肝脏和对照组对应部位肝脏。采用RNA测序(RNA-sequence,RNA-seq)技术检测实验组和对照组肝脏mRNA转录组的表达差异,并对差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)进行生物信息学分析和实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)验证。结果:与对照组比,感染15天和75天实验组肝脏中分别检测出152个和558个DEGs,分别占所有被检测的mRNA基因的百分比为0.85%和3.12%。通过GO和KEGG分析,发现这些DEGs涉及肝脏的免疫反应、物质代谢、纤维化和组织增生修复等功能,并与MHC抗原加工、呈递,IFN受体介导的信号级联反应,细胞色素P450,TGF-β信号通路等有关。对部分DEGs的q RT-PCR验证结果与RNA-seq一致。结论:亚洲带绦虫寄生可导致乳猪肝脏组织中出现显著性的差异基因表达,特定的DEGs参与肝脏的新陈代谢,免疫应答和组织修复或再生等生物过程。这些结果可能有助于阐明宿主-寄生虫相互作用的分子机制。
【学位单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R383.3
【部分图文】：

图 1 带绦虫头节Fig.1 Scolex of Taenia图 2 带绦虫孕节Fig.2 Gravid proglottid of Taenia2.1.3 带绦虫成虫分子生物学鉴定用从良亩乡带绦虫提取的 DNA，以亚洲带带绦虫 cox1 基因片段的特异性引物（Tasia：5’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的反向引物（Rev:5’-GACATAACATAATGAAAATG-3’），经 PCR 扩增和琼脂糖凝胶电泳，均扩增出约 260 bp 的产物，而以牛带绦虫 cox1 基因片段的特异性引物（Tsag：5’-TTGATTCCTTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 为引物的 PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳，均未见扩增产物（图 3）。

图 1 带绦虫头节Fig.1 Scolex of Taenia图 2 带绦虫孕节Fig.2 Gravid proglottid of Taenia2.1.3 带绦虫成虫分子生物学鉴定用从良亩乡带绦虫提取的 DNA，以亚洲带带绦虫 cox1 基因片段的特异性引物（Tasia：5’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的反向引物（Rev:5’-GACATAACATAATGAAAATG-3’），经 PCR 扩增和琼脂糖凝胶电泳，均扩增出约 260 bp 的产物，而以牛带绦虫 cox1 基因片段的特异性引物（Tsag：5’-TTGATTCCTTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 为引物的 PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳，均未见扩增产物（图 3）。

绦虫头节colex of Taenia图 2 带绦虫孕节Fig.2 Gravid proglottid虫分子生物学鉴定乡带绦虫提取的 DNA，以亚洲带带绦虫 cox1 基因片段’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的ATAACATAATGAAAATG-3’），经 PCR 扩增和琼脂糖0 bp 的产物，而以牛带绦虫 cox1 基因片段的特异性引TTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 为引物的 PC，均未见扩增产物（图 3）。
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本文编号：2857239