肠道与肺中ILC2细胞不同免疫反应特性研究

发布时间：2020-11-02 16:40

　　 目的:探讨肠道与肺中固有淋巴细胞2(innate lymphoid cell2,ILC2)的不同免疫反应特性。方法 :使用real-time PCR检测肠道和肺中ILC2细胞转录因子及细胞因子的表达;EdU方法检测肠道和肺中ILC2细胞对不同细胞因子刺激的增殖反应;观察Notch信号抑制剂GSI对肠道和肺中ILC2细胞体外增殖的影响。结果:与肺ILC2细胞相比,肠道ILC2细胞IL-13、IL-17、IFN-γ及IL-25受体IL17RB表达显著升高,而IL-5、IL-33受体IL1RL1显著降低。IL-25能显著提高肠道ILC2体外增殖能力;GSI抑制Notch信号后显著降低IL-25促进肠道ILC2体外增殖能力。结论:肠道与肺中ILC2表达不同的细胞因子,依赖于IL-25的肠道ILC2增殖能力受Notch信号影响。
【部分图文】：

肠ILC2细胞与肺ILC2细胞相比，IL-13 mRNA(3.47±0.73 vs 0.97±0.17）及IFN-γmRNA(2.45±0.74 vs1.08±0.25）表达显著升高，差异均有统计学意义（P<0.05);IL-17 mRNA(1.46±0.90）在肠ILC2中高表达而在肺ILC2中不表达，但IL-5 mRNA(0.38±0.12 vs0.98±0.17）表达显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）；肠ILC2转录因子GATA3 mRNA表达量升高（1.19±0.23），但与肺ILC2(0.98±0.17）的差异无统计学意义（P>0.05）。见图1。以上结果提示肠和肺中ILC2表达的细胞因子和转录因子差异巨大。2.2 IL-25对肠和肺ILC2细胞体外增殖及活化的影响

EdU检测结果显示，肠ILC2在IL-25刺激下，与肺相比，体外增殖提高约8倍（43.50±14.89 vs5.47±2.17），差异有统计学意义（P<0.05）（图2A);IL-25刺激后肠ILC2 IL-5 mRNA(3.20±0.91）和IL-13 mRNA(15.88±8.28）表达水平分别显著高于肺ILC2(1.00±0.26）、（0.82±0.10），差异均有统计学意义（P<0.05）（图2B）。以上结果提示IL-25可以促进肠ILC2的活化和增殖。2.3 肠和肺ILC2 IL-25受体表达及IL-25对ILC2体内增殖的影响

肠ILC2与肺ILC2细胞相比，IL17RB(IL-25受体）mRNA(85.25±22.16 vs 1.43±0.17）表达水平显著升高，而传统ILC2活化IL1RL1(IL-33受体）mRNA(0.02±0.01 vs1.07±0.18）表达水平显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）（图3A）。分别用IL-33(500 ng/d）、IL-25(500 ng/d）腹腔注射C57BL/6小鼠3天后，EdU检测结果显示，IL-25刺激后肠内ILC2细胞增殖显著增加，而IL-33刺激后肺中ILC2细胞增殖显著增加，差异均有统计学意义（P<0.05）（图3B）。以上结果提示肠ILC2高表达IL-25受体IL17RB，而肺ILC2高表达IL-33受体IL1RL1，体内实验进一步证实IL-25是肠ILC2增殖和活化的刺激剂。2.4 Notch信号对IL-25介导的肠ILC2体外增殖的影响
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本文编号：2867294