氟化超支化聚酰胺-胺作为流感DNA疫苗递送载体的研究

发布时间：2020-11-05 07:59

　　 本文设计合成了氟化超支化聚酰胺-胺并研究其作为流感DNA疫苗递送载体的能力。首先采用迈克尔加成反应合成超支化聚酰胺-胺聚合物[hyperbranched poly(amido amine)s,HP],并进行氟化修饰(fluorinated HP,F-HP)通过设计特异性引物扩增目的基因,构建流感病毒PR8的核蛋白(nucleoprotein,NP)基因真核表达质粒,作为DNA疫苗,F-HP与NP质粒通过静电作用形成纳米复合物(F-HP/NP)。结果表明:所合成的HP的分子质量为59.7 kDa多分散系数(polydispersity index,PDI)为2.67,F-HP中氟元素的含量为20%(质量比,w/w),聚合物能与NP质粒络合形成球形的纳米粒。聚合物与DNA质量比为5～10时,纳米复合物的粒径分布在100 nm左右,并随质量比的升高而减小。氟化修饰有利于提高纳米复合物的细胞摄取及溶酶体逃逸能力,进一步提高NP的细胞内表达水平。体内免疫实验表明,与HP/NP纳米复合物相比,氟化修饰的F-HP/NP纳米复合物对CD8~+T细胞具有更强的免疫应答诱导效应。以上结果说明氟化修饰的超支化聚酰胺-胺作为DNA疫苗载体具有可行性。动物实验经扬州大学大学实验动物伦理委员会批准。
【文章目录】：
材料与方法
结果
    1 超支化聚酰胺-胺阳离子聚合物的合成、氟化修饰及表征
    2 流感病毒PR8的NP基因重组质粒构建
    3 聚合物/质粒DNA纳米复合物的制备及表征
    4 细胞毒性
    5 细胞摄取与溶酶体逃逸
    6 免疫荧光鉴定NP蛋白的表达
    7 体内检测CD8+T淋巴细胞免疫反应
讨论

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张文卿;基因佐剂在DNA疫苗中的应用[J];国外医学(免疫学分册);2004年06期

2 陈勇;张朵;辛娜;熊永忠;陈平;李博;涂向东;兰风华;;精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及免疫避孕效果的实验研究[J];中国科学(C辑:生命科学);2008年02期

3 刘芬;汪希雅;高冬梅;余平;汪世平;;血吸虫生殖产卵相关基因pcDNA3/Sj SDISP DNA在小鼠体内的组织分布及整合的观察[J];中国人兽共患病学报;2009年10期

4 杨化强;曹以诚;;丙型肝炎病毒多表位DNA疫苗的研究进展[J];中国生物工程杂志;2007年01期

5 朱晓华,石佑恩;日本血吸虫脂肪酸结合蛋白DNA联合白细胞介素-12的免疫保护作用[J];医药导报;2005年04期

6 周智,陈文思,张海红,姚集鲁;重组酵母乙型肝炎疫苗和DNA疫苗交互免疫研究[J];中华肝脏病杂志;2003年04期

7 李绍君;韩明喜;;DNA倍体分析系统在脱落细胞学及术中病理诊断中的应用[J];中国农村卫生;2020年03期

8 阳方;李俊君;董良;俞旭君;常德贵;张磊;;精子DNA完整性损伤的发生机制及诊断治疗[J];中国男科学杂志;2016年09期

9 李桂满;王慧雯;颜军;张烜榕;侯敏;;炭疽芽孢杆菌DNA提取中的生物安全[J];职业与健康;2016年20期

10 ;美国科学家绘制出吸烟导致DNA受损图谱[J];健康博览;2017年08期

相关博士学位论文 前10条

1 谢斯思;基于TALE组装的DNA支架增强外源多酶代谢通路[D];国防科技大学;2018年

2 谢琳娜;胞质DNA对细胞还原四氮唑和葡萄糖代谢的影响及其机制探讨[D];福建医科大学;2017年

3 苏晨鹤;Ⅰ型单纯疱疹病毒HSV-1皮层蛋白UL41逃逸宿主DNA识别信号通路抗病毒天然免疫的分子机制[D];苏州大学;2017年

4 田茂鹏;DMT佐剂增强DNA疫苗免疫原性和抗结核分枝杆菌感染保护效果研究[D];华中科技大学;2018年

5 刘云龙;基因标志物数字化检测新方法研究[D];南京大学;2017年

6 黄宏;细菌内毒素、脂蛋白、DNA的协同效应研究[D];第三军医大学;2004年

7 洪沙;缺失突变HCV核蛋白DNA免疫效果的初步评价[D];第四军医大学;2005年

8 刘建文;外源质粒DNA经胃肠道吸收对小鼠基因表达谱影响的初探[D];江南大学;2005年

9 刘更;1.低浓度MNNG激活内质网应激及其对EGFR通路的影响 2.内质网应激参与低浓度DNA加成性损伤剂诱发的细胞应答反应[D];浙江大学;2005年

10 黄庆生;组织型纤溶酶原激活物DNA改组的探索研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2001年

相关硕士学位论文 前10条

1 陈勇;精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的粘膜免疫及其效果的动物实验研究[D];福建医科大学;2006年

2 王天赐;高尔基体跨膜蛋白73对DNA感受通路和干扰素通路调控的研究[D];武汉大学;2017年

3 高天勇;不同pH值下二价离子对DNA凝聚的影响[D];温州大学;2019年

4 郑康;梅毒螺旋体鞭毛蛋白（FlaB3）DNA疫苗抗感染免疫保护作用研究[D];南华大学;2019年

5 杨盛慧;NTHi-DNA诱导的IFN-I上调宿主炎性应答及对不可分型流感嗜血杆菌易感性影响的初步研究[D];重庆医科大学;2019年

6 卜静静;AUF1通过RRM1/2结构域结合胞质DNA[D];福建医科大学;2017年

7 李婷玉;泛素交联酶RAD6B在UV诱导的DNA损伤修复中作用的研究[D];兰州大学;2019年

8 叶瑞婕;Ⅰ型单纯疱疹病毒去泛素化酶UL36USP逃逸DNA受体识别信号通路的分子机制[D];苏州大学;2016年

9 田然;参与DNA损伤应答lncRNA的鉴定及其功能的初步研究[D];大连医科大学;2018年

10 朱瑞;应答DNA损伤的果蝇miRNA鉴定及其凋亡功能初探[D];大连医科大学;2018年

本文编号：2871353