乙醇、丙酮和氯化钙对W135群脑膜炎球菌荚膜多糖唾液酸含量检测的影响

发布时间：2020-11-17 01:55

　　 目的研究乙醇、丙酮和氯化钙是否影响间苯二酚法测定W135群脑膜炎球菌荚膜多糖(group W135 meningococcal capsular polysaccharide)唾液酸(sialic acid)含量。方法用苯酚法制备W135群脑膜炎球菌荚膜多糖;分别定量检测唾液酸和W135群脑膜炎球菌荚膜多糖添加不同质量浓度乙醇、丙酮和氯化钙,用间苯二酚法测定其唾液酸含量,检测乙醇、丙酮和氯化钙对间苯二酚测定唾液酸含量的影响。结果添加质量浓度≥39.5μg/mL的乙醇和≥9.9μg/mL的丙酮对唾液酸含量测定均有影响,其中乙醇影响不明显,丙酮的影响极为明显,而不同加入量的氯化钙均对唾液酸含量的测定无影响。结论乙醇和丙酮对间苯二酚法测定唾液酸含量有影响,二者可能会对W135群脑膜炎球菌荚膜多糖质量控制产生影响。
【部分图文】：

对脑膜炎球菌疫苗制造和质量控制来讲,精确测定多糖中特异单糖的含量非常重要,因为特异单糖含量是反映多糖的纯度、计算半成品和成品疫苗每种多糖含量的数据基础。W135群脑膜炎球菌荚膜多糖(group W135 meningococcal capsular polysaccharide)是以唾液酸和半乳糖为重复单位的高分子聚糖(见图1),在其提取纯化过程中用到乙醇、丙酮和氯化钙等化学试剂,而目前尚未发现有关残留化学试剂对唾液酸含量测定影响的报道。现就乙醇、丙酮和氯化钙残留是否影响W135群脑膜炎球菌荚膜多糖中唾液酸含量测定进行了研究,为W135群脑膜炎球菌荚膜多糖质量控制提供参考。1 材料与方法

表1 不同质量浓度参考品的吸光值Tab.1 Absorbance mass corresponding to different sialic acid concentrations 不同参考品质量浓度(μg/mL) A585 nm值 0.000 0.000 4.000 0.052 8.000 0.095 16.000 0.194 32.000 0.385 64.000 0.7492.2 乙醇、丙酮和氯化钙对唾液酸测定的影响
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