免疫抑制对感染EB病毒树鼩的影响
发布时间：2020-12-10 04:04
目的:EB病毒与人类多种良恶性疾病相关,如单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、移植后淋巴增生性疾病等。长期以来,由于缺乏合适的动物模型,EB病毒与相关疾病等研究进展缓慢。树鼩是一种与灵长类亲缘关系近的小型新兴实验动物,在研究人类疾病方面有着巨大潜力。本课题组在前期研究中初步建成了EB病毒感染树鼩模型,本研究将进一步对树鼩感染EB病毒模型进行探索。我们通过对树鼩进行口鼻接种EB病毒后对其静脉注射环孢素A进行免疫抑制,检测其EB病毒基因、蛋白等表达情况及组织病理改变,探究在此状态下EB病毒在树鼩体内是否具有与人类相似的生物学特性,初步探索树鼩是否可以作为EB病毒相关疾病动物模型。方法:选取健康成年树鼩20只,实验组树鼩16只,对照组4只树鼩。实验组通过口鼻接种液1ml 1.2×108copies/ml EB病毒液,对照组以同样方式接种1ml生理盐水,实验组和对照组树鼩观察6周后注射环孢素A 20mg/kg/天,连续注射6周。树鼩定期通过股静脉采血,分离外周血单个核细胞及血清;对树鼩进行解剖,收集重要器官组织。我们对树鼩进行外周血白细胞计数;qP...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PBMCs中EB病毒载量的变化（Ts1-16）
图 3-1. PBMCs 中 EB 病毒载量的变化（Tsure3-1.EBV copy number in PBMCs of tree shrew察期间均未检测到 EB 病毒拷贝数
（1）EBNA1 和 EBNA2 的表达情况：图 3-4 中总结了实验组每一只物在对应的时间（周）检测 EBNA1 和 EBNA2 的表达情况，蓝色框内表免疫抑制后第一周。实验组树鼩接种 EB 病毒后未注射免疫抑制剂之前观期间内，经过 RT-PCR 的检测，可观察到，在病毒感染后 6 周的观察期EBNA1、EBNA2 的表达频次不高，散在出现，集中在接种病毒后的第 周。注射免疫制剂后，EBNA1、EBNA2 在不同动物中表达，出现不同程的表达增多，EBNA2 较为明显。但 Ts7,9,15 无论在注射免疫抑制剂前后没有出现 EBNA1 的表达。实验组树鼩在停止注射免疫抑制剂之后，EBN仍然持续表达。EBNA2 的表达主要出现在免疫抑制后阶段，Ts4,9,15 在个观察期间均未表达 EBNA2，其余动物均在注射环孢素 A 免疫抑制后表EBNA2 基因产物。在 RT-PCR 的实验中内参：β-actin，阳性对照：B9的 cDNA。
【参考文献】：
期刊论文
[1]树鼩在人类肿瘤疾病动物模型中的应用进展[J]. 夏巍,赖永静,杜龙,王梦琳,王红,戢克铜,冯清源,唐安洲. 动物医学进展. 2019(03)
[2]宏基因组大数据分析的质量控制流程规范[J]. 郑广勇,杨桢,曹瑞芳,刘婉,李亦学,张国庆. 大数据. 2018(03)
[3]DNA测序技术的发展进程[J]. 毛亚文,陈江华. 亚热带植物科学. 2018(01)
[4]全血中EB病毒DNA定量检测在鼻咽癌患者预后中的临床意义[J]. 李勤琴,唱凯,邓少丽,陈鸣. 国际检验医学杂志. 2017(08)
[5]第三代测序技术的主要特点及其在病毒基因组研究中的应用[J]. 袁易,王铭杰,张欣欣. 微生物与感染. 2016(06)
[6]下一代测序(NGS)技术的发展及在肿瘤研究的应用[J]. 邵向阳,徐伟文. 分子诊断与治疗杂志. 2016(05)
[7]不同剂量环孢菌素A制备免疫缺陷小鼠模型的研究[J]. 张予晋,李玲,杨胜辉,高强,向琴,娄芳,王泽亮,郑萌,欧小香,王军文. 湖南中医药大学学报. 2014(11)
[8]全基因组外显子测序及其应用[J]. 张鑫,李敏,张学军. 遗传. 2011(08)
博士论文
[1]全基因组测序与病毒捕获测序技术探讨EB病毒进化及整合规律的初步研究[D]. 喻正源.中南大学 2013
本文编号：2908053
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PBMCs中EB病毒载量的变化（Ts1-16）
图 3-1. PBMCs 中 EB 病毒载量的变化（Tsure3-1.EBV copy number in PBMCs of tree shrew察期间均未检测到 EB 病毒拷贝数
（1）EBNA1 和 EBNA2 的表达情况：图 3-4 中总结了实验组每一只物在对应的时间（周）检测 EBNA1 和 EBNA2 的表达情况，蓝色框内表免疫抑制后第一周。实验组树鼩接种 EB 病毒后未注射免疫抑制剂之前观期间内，经过 RT-PCR 的检测，可观察到，在病毒感染后 6 周的观察期EBNA1、EBNA2 的表达频次不高，散在出现，集中在接种病毒后的第 周。注射免疫制剂后，EBNA1、EBNA2 在不同动物中表达，出现不同程的表达增多，EBNA2 较为明显。但 Ts7,9,15 无论在注射免疫抑制剂前后没有出现 EBNA1 的表达。实验组树鼩在停止注射免疫抑制剂之后，EBN仍然持续表达。EBNA2 的表达主要出现在免疫抑制后阶段，Ts4,9,15 在个观察期间均未表达 EBNA2，其余动物均在注射环孢素 A 免疫抑制后表EBNA2 基因产物。在 RT-PCR 的实验中内参：β-actin，阳性对照：B9的 cDNA。
【参考文献】：
期刊论文
[1]树鼩在人类肿瘤疾病动物模型中的应用进展[J]. 夏巍,赖永静,杜龙,王梦琳,王红,戢克铜,冯清源,唐安洲. 动物医学进展. 2019(03)
[2]宏基因组大数据分析的质量控制流程规范[J]. 郑广勇,杨桢,曹瑞芳,刘婉,李亦学,张国庆. 大数据. 2018(03)
[3]DNA测序技术的发展进程[J]. 毛亚文,陈江华. 亚热带植物科学. 2018(01)
[4]全血中EB病毒DNA定量检测在鼻咽癌患者预后中的临床意义[J]. 李勤琴,唱凯,邓少丽,陈鸣. 国际检验医学杂志. 2017(08)
[5]第三代测序技术的主要特点及其在病毒基因组研究中的应用[J]. 袁易,王铭杰,张欣欣. 微生物与感染. 2016(06)
[6]下一代测序(NGS)技术的发展及在肿瘤研究的应用[J]. 邵向阳,徐伟文. 分子诊断与治疗杂志. 2016(05)
[7]不同剂量环孢菌素A制备免疫缺陷小鼠模型的研究[J]. 张予晋,李玲,杨胜辉,高强,向琴,娄芳,王泽亮,郑萌,欧小香,王军文. 湖南中医药大学学报. 2014(11)
[8]全基因组外显子测序及其应用[J]. 张鑫,李敏,张学军. 遗传. 2011(08)
博士论文
[1]全基因组测序与病毒捕获测序技术探讨EB病毒进化及整合规律的初步研究[D]. 喻正源.中南大学 2013
本文编号：2908053
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