基于碳酸钙微球的乙肝疫苗佐剂构建及免疫增强效果研究
发布时间：2020-12-11 15:54
碳酸钙微球具有pH敏感特性而易于实现溶酶体逃逸来增强细胞免疫,并且钙离子能够促进免疫细胞活化,因此具备开发为疫苗佐剂的潜力。碳酸钙微球众多制备方法中最简单的是钙盐和碳酸盐参与的复分解法,但存在粒径不均一、重现性差,在无添加物的水溶液中难以得到小粒径微球等问题。针对此现状,本论文优化了复分解法制备碳酸钙微球的反应参数,进一步制备小粒径的碳酸钙微球,并考察其理化性质（表面电荷、粒径、剂型等）对佐剂活性的影响,分析作用机制,为无机纳微颗粒佐剂的合理设计提供新思路和理论依据。具体研究内容包括以下五个方面:1)采用氯化钙和碳酸钠反应生成碳酸钙沉淀,系统优化反应参数,调控碳酸钙颗粒形态结构,在最优条件下制得了粒径均一、约4 μm的载抗原碳酸钙微球,再利用静电相互作用在微球表面镀层修饰鱼精蛋白和聚谷氨酸,得到不同表面电荷的碳酸钙微球,在动物水平考察其对免疫细胞活化、细胞因子及抗体分泌水平的影响,结果表明,荷正电的镀层微球诱导更高水平的体液和细胞免疫应答,具有更好的佐剂效果。2)为了进一步制备小粒径碳酸钙微球,在上述最优制备条件基础上,采用了机械搅拌、均质和超声等不同的反应混合方法,在无添加物的情况下...
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所)北京市
【文章页数】：185 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１乙肝病毒表面抗原结构７Ｆ意图??Ｆｉｇ．?１．１?Ｔｈｅ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?化?Ｓ化ｕｃＵｉｒｅ?ｏｆ?ｈｅｐａｔｉｔｉｓ?Ｂ?ｓｕｒｆａｃｅ?ａｎｔｉｇｅｎ??
速发挥抗感染免疫作用，同时也参与机体内对不利细胞的清除固有免疫在机体防??御机制中具有非常重要的意义，可作为抵御致病微生物感染的第一道防线，在疫苗接??种过程中也发挥重要作用（图１．２）。??Ｓｋｅｌｅｔａｌ?ｍｕｓｃｌｅ??Ｈ?贷曲？？？？？？？？？：貧?Ｍａｃｍｐｈａｇｅ??謬?／?，鐵好宿＾?：?％，：－古吿鑛釀◎?Ｍｏｎｏｃｙｔｅ??觀Ｋ?誤論Ｖ。＂。。??＾?？?ＭＨＣＩＩ：?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ??Ｉ．?Ｏｋ?１?Ｃｏ－ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ?ＣＤ８０／ＣＤ８６??Ｄｒａｉｎｉｎｇ?ｌｙｍｐｈ?ｎｏｄｅ??图１．２佐剂疫苗与固有免疫应答ｔｓｓｉ??Ｆｉｇ．?１．２?Ｉｎｎａｔｅ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎ化ｓ?ｏｆ?ａｄｊｕｖａｎ化ｄ?ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ?ｖａｃｃｉｎｅ??固有免疫系统由组织屏障、固有免疫细胞和固有免疫分子组成，其中，组织屏障??主要包括皮肤黏膜屏障和体内的血－脑屏障、血－胎屏障和血－脚腺屏障四类ｔｓｑ。皮肤黏??膜屏障，主要为体表覆盖的皮肤及腔道内衬着的粘膜，将全身各组织器官封闭在内部，??成为机体的首道防线。血－脑屏障可阻挡血液中病原体进入脑组织，保护中枢神经系??统的安全：血－胎屏障是母体与胎儿之间的屏障，保护胎儿免受母体内病原体的侵袭；??血－胸腺巧障是为了防止血液中的一些大分子如抗体、细胞色素Ｃ等进入胸腺皮质，??维持胸腺内的稳定、保证胸腺细胞正常发育??
Ｆｉｇ．?１．３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｏｖｅｒｖｉｅｗ?ｏｆ?ａｎｔｉｇｅｎ－ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ??抗原提呈是指抗原被ＡＰＣｓ加工处理为化段，与ＭＨＣ分子结合成复合物呈现于??ＡＰＣｓ表面，最终被免疫细胞识别的全过程（图１．３）。根据抗原来源和类型不同，抗??原提呈可分为胞质溶胶途径（ＭＨＣＩ分子途径）、溶酶体途径（ＭＨＣＩＩ分子途径）、??交叉提呈途径和ＭＨＣ非依赖性的ＣＤ１抗原提呈途径ｔ７９Ｊ。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]白油佐剂粒径均一性与炎症和免疫学效应的相关性[J]. 刘雁南,王连艳,杨婷媛,刘艳辉,马光辉. 过程工程学报. 2015(04)
[2]Surface charge of PLA microparticles in regulation of antigen loading,macrophage phagocytosis and activation,and immune effects in vitro[J]. Yuying Liu,Xiaoming Chen,Lianyan Wang,Tingyuan Yang,Qipeng Yuan,Guanghui Ma. Particuology. 2014(06)
[3]Assessment of the immune responses to Treponema pallidum Gpd DNA vaccine adjuvanted with IL-2 and chitosan nanoparticles before and after Treponema pallidum challenge in rabbits[J]. ZHAO FeiJun,ZHANG XiaoHong,LIU ShuangQuan,ZENG TieBing,YU Jian,GU WeiMing,ZHANG YueJun,CHEN Xi,WU YiMou. Science China(Life Sciences). 2013(02)
本文编号：2910810
【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所)北京市
【文章页数】：185 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１乙肝病毒表面抗原结构７Ｆ意图??Ｆｉｇ．?１．１?Ｔｈｅ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?化?Ｓ化ｕｃＵｉｒｅ?ｏｆ?ｈｅｐａｔｉｔｉｓ?Ｂ?ｓｕｒｆａｃｅ?ａｎｔｉｇｅｎ??
速发挥抗感染免疫作用，同时也参与机体内对不利细胞的清除固有免疫在机体防??御机制中具有非常重要的意义，可作为抵御致病微生物感染的第一道防线，在疫苗接??种过程中也发挥重要作用（图１．２）。??Ｓｋｅｌｅｔａｌ?ｍｕｓｃｌｅ??Ｈ?贷曲？？？？？？？？？：貧?Ｍａｃｍｐｈａｇｅ??謬?／?，鐵好宿＾?：?％，：－古吿鑛釀◎?Ｍｏｎｏｃｙｔｅ??觀Ｋ?誤論Ｖ。＂。。??＾?？?ＭＨＣＩＩ：?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ??Ｉ．?Ｏｋ?１?Ｃｏ－ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ?ＣＤ８０／ＣＤ８６??Ｄｒａｉｎｉｎｇ?ｌｙｍｐｈ?ｎｏｄｅ??图１．２佐剂疫苗与固有免疫应答ｔｓｓｉ??Ｆｉｇ．?１．２?Ｉｎｎａｔｅ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎ化ｓ?ｏｆ?ａｄｊｕｖａｎ化ｄ?ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ?ｖａｃｃｉｎｅ??固有免疫系统由组织屏障、固有免疫细胞和固有免疫分子组成，其中，组织屏障??主要包括皮肤黏膜屏障和体内的血－脑屏障、血－胎屏障和血－脚腺屏障四类ｔｓｑ。皮肤黏??膜屏障，主要为体表覆盖的皮肤及腔道内衬着的粘膜，将全身各组织器官封闭在内部，??成为机体的首道防线。血－脑屏障可阻挡血液中病原体进入脑组织，保护中枢神经系??统的安全：血－胎屏障是母体与胎儿之间的屏障，保护胎儿免受母体内病原体的侵袭；??血－胸腺巧障是为了防止血液中的一些大分子如抗体、细胞色素Ｃ等进入胸腺皮质，??维持胸腺内的稳定、保证胸腺细胞正常发育??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]白油佐剂粒径均一性与炎症和免疫学效应的相关性[J]. 刘雁南,王连艳,杨婷媛,刘艳辉,马光辉. 过程工程学报. 2015(04)
[2]Surface charge of PLA microparticles in regulation of antigen loading,macrophage phagocytosis and activation,and immune effects in vitro[J]. Yuying Liu,Xiaoming Chen,Lianyan Wang,Tingyuan Yang,Qipeng Yuan,Guanghui Ma. Particuology. 2014(06)
[3]Assessment of the immune responses to Treponema pallidum Gpd DNA vaccine adjuvanted with IL-2 and chitosan nanoparticles before and after Treponema pallidum challenge in rabbits[J]. ZHAO FeiJun,ZHANG XiaoHong,LIU ShuangQuan,ZENG TieBing,YU Jian,GU WeiMing,ZHANG YueJun,CHEN Xi,WU YiMou. Science China(Life Sciences). 2013(02)
本文编号：2910810
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