重组人禽流感H7N9疫苗株在Vero细胞上的适应性和传代稳定性研究

发布时间：2020-12-12 09:00

　　本文主要研究重组人感染高致病性禽流感H7N9株作为主工作种子批在Vero细胞连续传代中的高产特性和传代稳定性,为疫苗开发提供前期研究。将重组获得的H7N9流感病毒Vero细胞适应株(A/Anhui/1/2013Va)按照病毒感染复数(MOI) 0. 01的病毒量接种于Vero细胞,并连续传15代。血凝试验检测每代病毒血凝效价,并绘制病毒在Vero细胞上的生长曲线;每代病毒用MDCK细胞检测病毒的感染性滴度;通过单向免疫扩散试验对重组病毒H7N9的第1及第16代进行型别鉴定;取第1、5及16代病毒,用鸡胚半数感染量及致死量检测病毒在传代过程中毒力变化;分别提取第1和16代H7N9流感病毒的RNA,反转录及克隆后测序,对比病毒在连续传代过程中血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的变化。试验结果表明:在连续传代过程中,病毒效价越来越趋于稳定,血凝效价稳定维持在384～448;病毒感染性滴度维持在7 Log10TCID50/mL左右;病毒在传代过程中毒力未发生显著变化; HA和NA在连续传代过程中并未出现因基因变异导致的编码氨基酸改变的状况。H7N9安徽株病毒在Vero细胞传代过程中不仅产量... 

【文章来源】：激光生物学报. 2020年03期 第268-273页

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

各代病毒的效价及感染性滴度

如图3所示:其中1和4是H7N9抗原标准品;2和5是第16代病毒;3和6是第1代病毒。重配病毒H7N9与NIBSC的标准抗H7N9抗血清反应后出现抗原抗体免疫复合物扩散环，虽然与标准H7N9抗原形成的环大小有差异，但是足以说明重配病毒H7N9血清型表型属于H7型。图3 单向免疫扩散型别鉴定结果图

单向免疫扩散型别鉴定结果图

【参考文献】：
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本文编号：2912242