洗涤血小板各组分促人/鼠成纤维细胞增殖初探
发布时间：2020-12-13 16:26
目的分析人血小板及其洗涤后获得的各组分补体灭活前后对小鼠成纤维细胞（L929）和人成纤维细胞（HDP）的增殖作用。方法将所制备的新鲜人富血小板血浆（PRP）3份及血小板浓缩液（PC）5份（50 mL/份）,分别用20 mL 0.9%生理盐水洗涤2次,重悬以获得贫血小板血浆（PPP）、生理盐水上清、洗涤血小板（WP）3个组分,同未经处理的PRP及PC一道,分别冻融留取对照样品后作补体灭活处理,ELASA方法测试补体灭活前后血小板源性生长因子（PDGF-AB）、转化生长因子（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子（EGF）含量,CCK-8试剂盒测定补体灭活前后对L929/HDP细胞的增殖作用。结果 PRP及洗涤各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF及EGF含量比较,P>0.05,PC及各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF、EG及TGF-β1含量比较均无明显差异（P>0.05）。PRP及WP促L929细胞增殖比较:PRP为0.68±0.12 vs 2.13±0.18（P<0.05）,WP为0.69±0.12 vs 0.66±0.13（P>...
【文章来源】：中国输血杂志. 2013年07期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
ＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用
);各组分补体灭活前细胞增殖率比较，生理盐水上清与WP、PPP有明显差异(t值分别为0.99、6.78，P＜0.05);各组分补体灭活后细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清、PPP有明显差异(t值分别为2.81.、2.85，P＜0.05)(图1)。图1PＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用2.3.2PＲP及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞增殖的影响补体灭活前后HDP细胞增殖率:PＲP为1.36±0.09vs1.30±0.11，WP为1.26±0.04vs1.33±0.10，生理盐水上清为1.01±0.08vs0.98±0.04，PPP为1.21±0.08vs1.22±0.12(图2)。图2PＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞的增殖作用2.3.3PC及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞增殖的影响补体灭活前后L929细胞增殖率:PC为0.42±0.05vs1.94±0.19(t=6.52，P＜0.05)，WP为1.69±0.13vs1.93±0.19，生理盐水上清为0.88±0.13vs1.01±0.12，PPP为0.64±0.14vs1.49±0.15(t=3.36，P＜0.05);各组分补中国输血杂志2013年7月第26卷第7期ChinJBloodTransfusionJuly，2013，Vol．26，No．7·609·
体灭活前细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清、PPP有明显差别(t值分别为4.84、0.17，P＜0.05);各组分补体灭活后细胞增率比较，WP与生理盐水上清差别明显(t=7.26，P＜0.05)(图3)。另外，光镜下显示;灭活前PC对L929细胞有明显的抑制作用，灭活后促细胞增殖作用明显，而灭活前后WP对L929细胞的促进作用均较明显(图4)。图3PC样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用A补体灭活前B补体灭活后注:APC;BWP图4PC样品及其WP补体灭活L929细胞增殖的影响2.3.4PC及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞增殖的影响补体灭活前后HDP细胞增殖率:PC为1.32±0.07vs1.28±0.09，WP为1.39±0.13vs1.44±0.13，生理盐水上清为1.06±0.08vs1.10±0.07，PPP为1.28±0.11vs1.43±0.09。组细胞的增殖率，未灭活补体:;各组分补体灭活前后细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清具有明显差别(t灭活前=6.11、t灭活后=4.50，P＜0.05)(图5)。图5PC样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞的增殖作用3讨论血小板相关制剂促细胞增殖是多因素协同作用的复杂过程［6］，我们将PＲP及PC用生理盐水洗涤，获得WP、生理盐水上清、PPP，加之做对照的PＲP与PC，分别测试冻融法制备的各组分PDGF-AB、VEGF、EGF及TGF-β1含量:补体灭活前后各PGFs含量相近(表1)。早有研究者指出部分PGFs(如PDGF-AB)的热稳定性好［8，9］，我们选取4种PGFs所作的测试显示，补体灭活过程对其活性的影响较校血小板保存时间不同，血小板及其经洗涤获得组分的PGFs含量便存在一定差异:新鲜静脉血制备的PＲP洗涤后，各种PGFs含量在生理盐水上清均较其他3种组分少(P＜0.05);血站制备的PC洗涤后，不但各种PGFs在生理盐水上清中含量均较少，而且明显也低于P
【参考文献】：
期刊论文
[1]人洗涤血小板促进成骨细胞增殖与前列腺素E2的作用[J]. 李洪涛,段建民,匡威,菊地宽高,片山直. 中国组织工程研究. 2012(42)
[2]过期血液中血小板生长因子促细胞增殖作用的初步研究[J]. 于晶晶,王红,刘曦,袁理,刘嘉馨. 中国输血杂志. 2012(06)
[3]表皮生长因子含漱液中mEGF活性及热稳定性的实验研究[J]. 陈少萍,李文明,程斌,高峰,邱鹏新. 广东药学. 2001(04)
[4]PDGF的性质、与疾病的关系及其临床应用[J]. 方玉强. 微生物学免疫学进展. 1996(04)
本文编号：2914830
【文章来源】：中国输血杂志. 2013年07期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
ＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用
);各组分补体灭活前细胞增殖率比较，生理盐水上清与WP、PPP有明显差异(t值分别为0.99、6.78，P＜0.05);各组分补体灭活后细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清、PPP有明显差异(t值分别为2.81.、2.85，P＜0.05)(图1)。图1PＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用2.3.2PＲP及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞增殖的影响补体灭活前后HDP细胞增殖率:PＲP为1.36±0.09vs1.30±0.11，WP为1.26±0.04vs1.33±0.10，生理盐水上清为1.01±0.08vs0.98±0.04，PPP为1.21±0.08vs1.22±0.12(图2)。图2PＲP样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞的增殖作用2.3.3PC及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞增殖的影响补体灭活前后L929细胞增殖率:PC为0.42±0.05vs1.94±0.19(t=6.52，P＜0.05)，WP为1.69±0.13vs1.93±0.19，生理盐水上清为0.88±0.13vs1.01±0.12，PPP为0.64±0.14vs1.49±0.15(t=3.36，P＜0.05);各组分补中国输血杂志2013年7月第26卷第7期ChinJBloodTransfusionJuly，2013，Vol．26，No．7·609·
体灭活前细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清、PPP有明显差别(t值分别为4.84、0.17，P＜0.05);各组分补体灭活后细胞增率比较，WP与生理盐水上清差别明显(t=7.26，P＜0.05)(图3)。另外，光镜下显示;灭活前PC对L929细胞有明显的抑制作用，灭活后促细胞增殖作用明显，而灭活前后WP对L929细胞的促进作用均较明显(图4)。图3PC样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对L929细胞的增殖作用A补体灭活前B补体灭活后注:APC;BWP图4PC样品及其WP补体灭活L929细胞增殖的影响2.3.4PC及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞增殖的影响补体灭活前后HDP细胞增殖率:PC为1.32±0.07vs1.28±0.09，WP为1.39±0.13vs1.44±0.13，生理盐水上清为1.06±0.08vs1.10±0.07，PPP为1.28±0.11vs1.43±0.09。组细胞的增殖率，未灭活补体:;各组分补体灭活前后细胞增殖率比较，WP与生理盐水上清具有明显差别(t灭活前=6.11、t灭活后=4.50，P＜0.05)(图5)。图5PC样品及其洗涤后获得的各组分补体灭活对HDP细胞的增殖作用3讨论血小板相关制剂促细胞增殖是多因素协同作用的复杂过程［6］，我们将PＲP及PC用生理盐水洗涤，获得WP、生理盐水上清、PPP，加之做对照的PＲP与PC，分别测试冻融法制备的各组分PDGF-AB、VEGF、EGF及TGF-β1含量:补体灭活前后各PGFs含量相近(表1)。早有研究者指出部分PGFs(如PDGF-AB)的热稳定性好［8，9］，我们选取4种PGFs所作的测试显示，补体灭活过程对其活性的影响较校血小板保存时间不同，血小板及其经洗涤获得组分的PGFs含量便存在一定差异:新鲜静脉血制备的PＲP洗涤后，各种PGFs含量在生理盐水上清均较其他3种组分少(P＜0.05);血站制备的PC洗涤后，不但各种PGFs在生理盐水上清中含量均较少，而且明显也低于P
【参考文献】：
期刊论文
[1]人洗涤血小板促进成骨细胞增殖与前列腺素E2的作用[J]. 李洪涛,段建民,匡威,菊地宽高,片山直. 中国组织工程研究. 2012(42)
[2]过期血液中血小板生长因子促细胞增殖作用的初步研究[J]. 于晶晶,王红,刘曦,袁理,刘嘉馨. 中国输血杂志. 2012(06)
[3]表皮生长因子含漱液中mEGF活性及热稳定性的实验研究[J]. 陈少萍,李文明,程斌,高峰,邱鹏新. 广东药学. 2001(04)
[4]PDGF的性质、与疾病的关系及其临床应用[J]. 方玉强. 微生物学免疫学进展. 1996(04)
本文编号：2914830
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/2914830.html
