Cochlin在豚鼠近视模型眼中异常表达的检测及验证

发布时间：2020-12-15 21:21

　　研究目的:近视已成为一种流行病,常伴随眼轴伸长及后极部脉络膜和巩膜组织变薄等病理性改变。然而,介导脉络膜和巩膜变薄的因素仍不清楚。本研究旨在通过高通量蛋白质组学技术探寻与豚鼠实验性近视密切相关的差异表达蛋白,以期揭示近视发病机制中的关键蛋白,为探寻近视干预的有效靶点提供新思路。研究方法:选取3周龄的花色豚鼠随机分为3组,饲养6周。正常对照组不予任何处理,形觉剥夺（form-deprived myopia,FDM）组和光学离焦（lens-induced myopia,LIM）组的右眼分别给予半透明乳胶气球遮盖和-10.00 D凹透镜配戴处理,左眼作为自身对照。在造模后0周、2周、4周及6周时,分别测量3组豚鼠眼球的屈光度、眼轴长度和角膜曲率半径。造模6周后,深度麻醉并处死所有豚鼠,迅速摘取右眼。部分眼球用于石蜡切片,行H&E染色观察后极部巩膜的厚度和形态变化。随即收集剩余右眼的后极部组织,部分行高通量蛋白质组学分析,以检测3组间的差异表达蛋白。通过免疫组织化学法检测3组后极部组织中Cochlin的分布和表达变化。随后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别在FDM组和正常对照组... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
一、豚鼠形觉剥夺性近视与光学离焦性近视模型的建立
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验动物及分组
        1.1.2 豚鼠形觉剥夺性近视模型和光学离焦性近视模型的构建
        1.1.3 眼球生物学参数的测量
        1.1.4 主要的实验试剂及器材
        1.1.5 统计学分析
    1.2 结果
        1.2.1 屈光度的比较
        1.2.2 眼轴长度的比较
        1.2.3 角膜曲率半径的比较
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、高通量蛋白质组学揭示Cochlin在豚鼠近视模型眼中的异常表达及其验证
    2.1 对象和方法
        2.1.1 样本收集
        2.1.2 组织病理学检测
        2.1.3 iTRAQ分析
        2.1.4 免疫组织化学染色
        2.1.5 实时荧光定量PCR检测
        2.1.6 蛋白质印迹法检测
        2.1.7 主要的实验试剂及器材
        2.1.8 统计学分析
    2.2 结果
        2.2.1 组织病理学结果
        2.2.2 差异表达蛋白检测结果
        2.2.3 功能富集分析结果
        2.2.4 信号通路富集分析结果
        2.2.5 免疫组织化学法检测结果
        2.2.6 豚鼠FDM模型中Coch m RNA的表达变化
        2.2.7 豚鼠FDM模型中Cochlin的表达变化
    2.3 讨论
        2.3.1 豚鼠FDM模型与LIM模型的蛋白质组学分析
        2.3.2 蛋白Cochlin调控近视的潜在机制
    2.4 小结
结论
不足之处及后续开展的研究工作
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 近视分子致病机制的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]视黄酸在实验性近视发生中作用的研究进展[J]. 于曼容,戴锦晖.  中华实验眼科杂志. 2017 (06)
[2]豚鼠进展性近视眼巩膜中Smad3和Ⅰ型胶原的动态表达变化[J]. 姜波,吴章友,朱子诚,胡威,展欣.  中华实验眼科杂志. 2017 (06)
[3]中国大陆地区小学生近视患病率Meta分析（英文）[J]. 徐喜卿,李顺平,徐艳娇,韦杰.  国际眼科杂志. 2016(07)
[4]豚鼠实验性近视诱导方法及形成过程[J]. 陈蜜朵,周希瑗.  国际眼科杂志. 2016(03)
[5]C57BL/6小鼠形觉剥夺性近视视网膜Pax6的表达及其启动子区域CpG岛甲基化的改变[J]. 王晓静,陈阿银,刘懋,赵福新,黄芙蓉,周翔天.  中华眼视光学与视觉科学杂志. 2015 (06)
[6]多巴胺在近视形成中作用的研究进展[J]. 孙文峰,杨景雷,周翔天.  中华眼视光学与视觉科学杂志. 2015 (06)
[7]AG490抑制STAT3信号通路活性对豚鼠形觉剥夺性近视巩膜重塑的调控[J]. 朱子诚,吴章友,温跃春,柯根杰.  中华实验眼科杂志. 2015 (06)
[8]MMP-2与近视关系的研究进展[J]. 田甜,朱煌.  中华眼视光学与视觉科学杂志. 2014 (08)
[9]Effects of hepatocyte growth factor on MMP-2 expression in scleral fibroblasts from a guinea pig myopia model[J]. Xiu-Juan Li,Xiao-Peng Yang,Guang-Ming Wan,Yu-Ying Wang,Jin-Song Zhang.  International Journal of Ophthalmology(English Edition). 2014(02)
[10]Comparison of form-deprived myopia and lens-induced myopia in guinea pigs[J]. Hui Xiao,Zhong-Yi Fan,Xiao-Dan Tian,Yan-Chun Xu.  International Journal of Ophthalmology(English Edition). 2014(02)

博士论文
[1]视网膜Sonic hedgehog信号介导PI3K/AKT通路在豚鼠形觉剥夺性近视模型中的作用及机制研究[D]. 马飞.复旦大学 2014



本文编号：2918919