CD3E蛋白真核表达及全人源CD3单克隆抗体的制备

发布时间：2020-12-17 03:30

　　目的:高效真核表达和纯化获得CD3E蛋白,制备全人源CD3抗体。方法:构建CD3E链胞外区真核表达质粒,利用293F悬浮细胞表达系统表达并纯化获得高纯度蛋白。选取人源化抗体转基因小鼠CAMouse-HG76进行免疫,通过细胞融合的方法获得杂交瘤细胞,再利用ELISA法和流式细胞分析法筛选CD3特异性单克隆抗体。结果:成功构建重组表达载体pcDNA3.4-CD3E-mFc,真核细胞表达并纯化获得纯度为85%的融合蛋白。免疫小鼠后效价高达1∶102 400。杂交瘤细胞筛选获得3株CD3特异性单克隆抗体。结论:本研究成功获得了CD3E融合蛋白和CD3单克隆抗体,为后续建立ELISA检测方法、全人源治疗性抗体药物及相关研究提供基础。 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020年08期 北大核心

【文章页数】：6 页

【图文】：

SDS-PAGE结果

pcDNA3.4-CD3E-mFc酶切鉴定图

Western blot结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]子宫内膜癌分子分型与PD-1/PD-L1阻断治疗[J]. 高境泽,吴霞.  中国免疫学杂志. 2018(04)
[2]抗人PD-L1单克隆抗体的制备及其应用[J]. 冯沛然,黄建芳,王敏珍,廖伟聪,郝代玲,向军俭.  中国免疫学杂志. 2017(06)



本文编号：2921334