MDCK细胞库的建立、检定及其生物学特性

发布时间：2020-12-17 23:16

　　目的建立MDCK细胞的主细胞库及工作细胞库,并进行检定,同时评价其生物学特性。方法从欧洲细胞保藏中心(European Collection of Authenticated Cell Culture,ECACC)引进1株MDCK细胞,经传代扩大培养后,分别建立主库及工作细胞库。按照《中国药典》三部(2015版)规定的方法对细胞库进行细胞活力、细胞形态、无菌、支原体及细胞内外源病毒因子检查,并对细胞生长状况、传代稳定性、流感病毒敏感性进行检测。结果建立的MDCK细胞主种子库及工作种子库细胞形态呈不规则的上皮样细胞状,生长状态良好,细胞活率分别为96. 0%和95. 5%,无菌、支原体及细胞内外源病毒因子检查结果均合格。MDCK细胞生长曲线均呈S型,培养48～96 h进入对数生长期,随后进入平台期。连续传10代48 h细胞活率在93. 0%～95. 5%之间,较稳定。MDCK细胞对流感病毒较敏感,对B型流感病毒的敏感性高于A型流感病毒。结论建立的主细胞库及工作细胞库各项检测结果均符合《中国药典》规定,具有良好的传代稳定性及流感病毒敏感性。 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020年04期

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

MDCK细胞形态的镜下观察（×10)

MDCK细胞及CCL-34细胞的生长曲线均呈S型，前期生长速度较慢，0～48 h为细胞的停滞期，随着细胞数的增多，48～96 h进入对数生长期，随后进入平台期，直至细胞密度降低为止。MDCK细胞于96 h后生长速度加快，细胞密度高于CCL-34细胞。见图2。2.3 MDCK细胞的传代稳定性

连续传10代，48 h细胞活率在93.0%～95.5%之间，较稳定；从P3代开始，传代过程中细胞密度处于较稳定的范围内，表明细胞传代过程中生长较稳定，见图3。2.4 MDCK细胞对流感病毒的敏感性

【参考文献】：
期刊论文
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[5]MDCK单克隆细胞库的建立及检定[J]. 张良艳,姚志东,邢丽,刘坤,王希良.  生物技术通讯. 2012(02)
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本文编号：2922881