抗SraP L-Lectin 抗体的制备及其抗金黄色葡萄球菌感染的功能研究
发布时间：2020-12-21 21:12
金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白（Serine-rich repeat protein,SRRP）又称富丝氨酸血小板结合蛋白（serine-rich adhesion for platelets,SraP）是金黄色葡萄球菌细胞壁锚定蛋白,其配体结合区的L-Lectin模序能够识别并结合细胞膜表面的唾液酸化受体,该受体在哺乳动物的血小板、肺及胃肠道等细胞表面均有表达。研究表明,SraP能够介导金黄色葡萄球菌与血小板的结合,促进感染性心内膜炎的发生发展。本课题通过基因工程技术表达重组SraPL-Lectin抗原,继而免疫小鼠,利用细胞融合技术制备抗SraPL-Lectin单克隆抗体,通过Western blot、ELISA等技术检测抗体活性,并通过细胞和动物实验,探讨该抗体在抗金黄色葡萄球菌感染过程中的功能。目的:利用基因工程技术制备SraPL-Lectin重组蛋白,细胞融合技术制备抗SraPL-Lectin单克隆抗体,通过体内外实验明确抗SraPL-Lectin抗体在抗金黄色葡萄球...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组质粒pET28a-srapL-Lectin的鉴定
重组蛋亡
图 3.重组蛋白 SraPL-Lectin的纯化与鉴定Figure3. Purification and identification of the recombinant SraPL-LectinDS-PAGE: M 标准蛋白分子量，1 流穿液，2 20mM 咪唑洗脱液，3 50mM 咪唑洗 100 mM 咪唑洗脱液，5 150 mM 咪唑洗脱液，6 200 mM 咪唑洗脱液，7 500 mM 咪液estern blot: M 标准蛋白分子量，1 抗 His 二抗鉴定重组蛋白 SraPL-Lectin 成功制备抗 SraPL-Lectin单克隆抗体.1 抗 SraPL-Lectin单克隆融合细胞株的筛选经 SraPL-Lectin抗原免疫，选取血清抗 SraPL-Lectin抗体效价最高的小鼠，胞与骨髓瘤细胞进行融合，经过亚克隆筛选，最终选取 5 株稳定表达抗PL-Lectin抗体的单克隆融合细胞株（图 4）。
本文编号：2930513
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
重组质粒pET28a-srapL-Lectin的鉴定
重组蛋亡
图 3.重组蛋白 SraPL-Lectin的纯化与鉴定Figure3. Purification and identification of the recombinant SraPL-LectinDS-PAGE: M 标准蛋白分子量，1 流穿液，2 20mM 咪唑洗脱液，3 50mM 咪唑洗 100 mM 咪唑洗脱液，5 150 mM 咪唑洗脱液，6 200 mM 咪唑洗脱液，7 500 mM 咪液estern blot: M 标准蛋白分子量，1 抗 His 二抗鉴定重组蛋白 SraPL-Lectin 成功制备抗 SraPL-Lectin单克隆抗体.1 抗 SraPL-Lectin单克隆融合细胞株的筛选经 SraPL-Lectin抗原免疫，选取血清抗 SraPL-Lectin抗体效价最高的小鼠，胞与骨髓瘤细胞进行融合，经过亚克隆筛选，最终选取 5 株稳定表达抗PL-Lectin抗体的单克隆融合细胞株（图 4）。
本文编号：2930513
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