不同Wnt信号分子对胚胎肝干细胞分化的影响研究

发布时间：2020-12-24 07:27

　　目的探讨不同Wnt蛋白对小鼠胚胎肝祖细胞HP14-19分化的作用,筛选有效的肝干细胞定向分化体系,为治疗肝衰竭提供理论基础。方法携带不同Wnt蛋白基因的19种重组腺病毒,分别感染HP14-19,检测清蛋白启动子启动的荧光素酶报告基因活性;实时荧光定量PCR检测detla蛋白DLK、甲胎蛋白（AFP）、清蛋白（ALB）、上皮特异性标志物细胞角蛋白（CK18）等肝细胞分化成熟相关标志物的表达情况;糖原（PAS）染色实验和吲哚菁绿（ICG）摄取实验用于检测肝细胞合成代谢功能。结果 19种Wnt腺病毒均能有效感染HP14-19细胞并表达相应的Wnt信号蛋白,随着处理时间的延长,荧光素酶值逐渐升高,其中Wnt3a的作用最明显;Ad-Wnt3a组肝干细胞标志DLK、AFP表达明显下降;肝细胞特异性成熟标志ALB、CK18明显上调;Ad-Wnt3a处理后PAS染色可见70%～80%的细胞染色阳性,细胞由多角形变为长梭形;ICG摄取实验可见大量绿色圆形或者多边形阳性细胞。结论 Wnt3a蛋白是诱导HP14-19细胞成熟分化的重要蛋白,诱导分化后的细胞类似于成熟肝细胞,有较强的合成代谢功能;对进一步研究... 

【文章来源】：国际检验医学杂志. 2020年17期

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

不同重组腺病毒对HP14-19细胞的感染情况（200×）

HP14-19转染后第4、6、9天的ALB-GLuc活性

实时荧光定量PCR结果显示，Ad-Wnt3a组肝干细胞标志DLK、AFP表达明显下降；肝细胞特异性成熟标志ALB、CK18明显上调（图3），差异有统计学意义（P<0.05）。图4 Ad-Wnt3a处理后HP14-19细胞PAS染色情况（100×）

【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt3a:functions and implications in cancer[J]. Sha He,Yi Lu,Xia Liu,Xin Huang,Evan T.Keller,Chao-Nan Qian,Jian Zhang.  Chinese Journal of Cancer. 2015(12)
[2]Wnt/β-catenin信号通路在肝细胞癌中的促进作用[J]. 谢亮海,蒋晗,吴福生.  南方医科大学学报. 2014(06)



本文编号：2935244