慢病毒转染SPOP基因对滋养层细胞HTR8-SVneo增殖和侵袭的影响及其机制

发布时间：2020-12-28 05:23

　　为了探讨慢病毒转染SPOP基因后对滋养层细胞HTR8-SVneo增殖和侵袭能力的影响,并阐明其可能的机制,分别构建过表达和敲低SPOP基因的慢病毒载体,转入到HTR8-SVneo细胞中。分别在荧光显微镜下观察转染的荧光效率。用qRT-PCR法检测感染病毒后的细胞中SPOP mRNA的表达量,Western blotting法检测各组细胞中SPOP、PTEN、AKT、p-AKT、GSK3β、p-GSK3β和GAPDH的表达量。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力。结果显示,在HTR8-SVneo、JAR和JEG3这3种滋养层细胞中,HTR8-SVneo细胞中SPOP蛋白表达相对最高。HTR8-SVneo细胞经慢病毒转染后,与对照组比较,过表达组中SPOP mRNA和蛋白表达量明显升高（p<0.01）,PTEN蛋白表达量升高,而p-AKT和p-GSK3β表达量降低,细胞的侵袭能力明显下降（p<0.05）,细胞增殖活力无明显变化。相反,敲低组中SPOP mRNA和蛋白表达量明显下降（p<0.01）,PTEN蛋白表达量降低,p... 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020年05期 北大核心

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

SPOP蛋白在3种人滋养层细胞系中的表达情况

转染病毒后各组HTR8-SVneo细胞中EGFP蛋白的表达情况(×100)

使用Transwell小室法对HTR8-SVneo细胞侵袭能力进行测定。与对照空载体组相比，过表达SPOP组细胞侵袭数量减少，差异有统计学意义(p<0.05)。相反，敲低SPOP组细胞侵袭数量明显增加，差异具有显著的统计学意义(p<0.01)(图6)。图4 qRT-PCR法检测转染后HTR8-SVneo细胞中SPOP m R-NA表达情况(t-test;**:p<0.01)

【参考文献】：
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本文编号：2943197