TGF-β对RAW264.7细胞增殖、凋亡的影响

发布时间：2020-12-29 23:23

　　目的探讨TGF-β对RAW264.7细胞增殖、凋亡的影响。方法采用RANKL和M-CSF诱导RAW264.7细胞培养24 h后,用不同浓度TGF-β分别作用RAW264.7细胞24、48、72 h。使用CCK-8试剂盒、流式细胞术及RT-PCR检测破骨前体细胞增殖、凋亡和特征性基因的表达差异。结果不同浓度（1、2、5 ng/mL）的TGF-β均能抑制RAW264.7细胞增殖,且与时间、浓度有关。TGF-β（5 ng/mL）处理组培养72 h后与其他浓度处理组相比,细胞增殖明显降低,细胞总凋亡率及线粒体凋亡通道相关基因Caspase-3、Caspase-8表达升高,差异具有显著性（P<0.05）。结论 TGF-β抑制RAW264.7细胞增殖,促进其凋亡,表明TGF-β在骨改建中发挥重要作用。 

【文章来源】：临床与实验病理学杂志. 2020年08期 北大核心

【文章页数】：3 页

【部分图文】：

CCK-8检测TGF-β对RAW264.7细胞增殖的影响:*P<0.05

骨组织缺损修复机制是目前关注的重点,除骨创伤修复外,其还与骨质疏松甚至骨肿瘤相关[5],且与牙槽骨吸收等口腔常见疾病有直接关系[6]。骨改建是一个连续的动态过程,主要通过成骨细胞与破骨细胞间相互作用共同调控新骨形成达到骨重建。其中,破骨细胞来自骨髓单核/巨噬细胞系,负责吸收骨组织中的骨质,是影响骨折愈合的关键细胞之一[7]。近年,骨折愈合过程中TGF-β调节的研究成为焦点。作为功能相似、结构相关的多肽生长因子和趋化因子,TGF-β影响骨生长、形态诱导和修复,具有重要研究价值。多种研究表明,TGF-β对骨组织的影响是双向的。长期以来TGF-β被认为是一种骨吸收抑制剂,高浓度的TGF-β可以增强骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和RANK的竞争性结合,从而抑制RANK与其配体的结合,导致破骨细胞的分化和成熟受到抑制。最近研究表明,在缺乏基质细胞的体外环境中,TGF-β可以诱导破骨前体细胞中NF-κB和RANK的表达,促进破骨细胞的形成[8-9]。因此,其对破骨细胞增殖和凋亡的影响一直存在争议。小鼠单核巨噬细胞RAW264.7是公认的破骨前体细胞,体外可以诱导形成破骨细胞[10]。目前文献报道TGF-β对RAW264.7细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响较小,且本课题组前期报道由于巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)与RANK在RAW264.7细胞系中可以同时表达,由此激活RANKL从而使RAW264.7细胞诱导分化为破骨细胞[11]。故在此基础上通过诱导RAW264.7细胞建立破骨细胞模型进行相关分析。图3 TGF-β对RAW264.7细胞凋亡的影响

TGF-β对RAW264.7细胞凋亡的影响


本文编号：2946530