人碱性成纤维生长因子对人脐带间充质干细胞增殖能力及多向分化潜能的影响

发布时间：2017-04-09 08:18

  本文关键词：人碱性成纤维生长因子对人脐带间充质干细胞增殖能力及多向分化潜能的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的: 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外培养增殖能力及多向分化潜能的影响 方法: 贴壁培养法培养hUC-MSCs后，应用流式细胞术分析其表面相对特异性标志物(CD90, CD105，CD73等)，初步证实其为间充质干细胞；培养并诱导P2代hUC-MSCs向成脂、成软骨及成骨的方向分化，以进一步鉴定其为间充质干细胞，且具有多向分化潜能。确定bFGF促增殖作用：分为实验组和对照组，实验组添加bFGF于DMED/F12培养液中，对照组使用DMED/F12常规培养液；同时对照观察加入不同浓度的bFGF对hUC-MSCs增殖的影响；MTT法测定hUC-MSCs的增殖能力，，确定bFGF促增殖作用最适浓度为30μg/L。 结果: 培养的细胞通过流式细胞术检测CD90、CD105、CD73和CD166为阳性表达，而不表达CD34、CD45和HLA-DR，说明具有间充质干细胞的表型特征。油红O染色和茜素红染色均呈阳性，说明具有向成脂、成骨方向分化能力。MTT法分析生长曲线提示bFGF具有显著促进hUC-MSCs的增殖作用（其最适浓度为30μg/L）。绘制hUC-MSCs生长曲线可见诱导后的hUC-MSCs连续培养7天可见细胞增殖趋势，接种后从第二天起实验组细胞增殖活跃，第3天达到增殖高峰，第4-5天各组细胞增殖处于平台期。 结论: hUC-MSCs具有良好的多向分化潜能，bFGF可促进hUC-MSCs增殖并增强hUC-MSCs的多向分化潜能，为后续大宗实验奠定了基础和提供充足优良的hUC-MSCs。
【关键词】：碱性成纤维细胞生长因子 人脐带间充质干细胞 细胞增殖 多向分化
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第1章 综述10-17
• 第2章 正文17-26
• 2.1 材料和方法17-19
• 2.1.1 实验材料17
• 2.1.2 主要仪器17-18
• 2.1.3 主要试剂18-19
• 2.1.4 主要培养基及试剂19
• 2.2 实验方法19-26
• 2.2.1 原代 hUCMSCs 的分离和培养19-20
• 2.2.2 流式细胞术检测 hUC-MSCs 表面标记20-21
• 2.2.3 成脂肪细胞诱导21
• 2.2.4 hUC-MSCs 成骨细胞诱导21-22
• 2.2.5 bFGF 对 hUC-MSCs 增殖能力的影响22
• 2.2.6 平板克隆实验检测 bFGF 对 hUC-MSCs 克隆形成能力22-23
• 2.2.7 bFGF 对 hUCMSCs 衰老的影响23-24
• 2.2.8 bFGF 对 hUC-MSCs 多向分化潜能的影响24
• 2.2.9 MTT 比色法分析 2 组 hUC-MSCs 的存活和增殖能力24-26
• 第3章 结果26-32
• 第4章 讨论32-36
• 第5章 结论36-37
• 参考文献37-44
• 导师、作者简介及在学期间所取得的科研成果44-47
• 致谢47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 Farbod Rastegar;Deana Shenaq;Eric R Wagner;Stephanie H Kim;Russell R Reid;Hue H Luu;Rex C Haydon;;Mesenchymal stem cells: Molecular characteristics and clinical applications[J];World Journal of Stem Cells;2010年04期

2 吴勇,吴织芬,王勤涛;骨形成蛋白-2和碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的联合效应[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2001年04期

3 陈运贤;何敏;刘建华;陈嘉榆;陈惠珍;张祥忠;朱小玉;陈求刚;项鹏;钟雪云;;心肌梗死大鼠血清促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用[J];中国病理生理杂志;2007年05期

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本文编号：294850