肠道病毒71型能诱导THP-1巨噬细胞的自噬和凋亡

发布时间：2021-01-01 06:54

　　目的探讨肠道病毒71型（EV71）诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路。方法设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16 h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0 h组。CCK-8检测EV71对THP-1巨噬细胞增殖和毒性的影响;荧光定量PCR法检测EV71在细胞内病毒核酸变化情况;透射电镜观察THP-1巨噬细胞内超微结构变化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI双染法检测EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡的情况;免疫印迹法分析EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡相关蛋白水平的变化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制剂分别检测EV71对THP-1巨噬细胞自噬和凋亡的影响。结果 EV71作用THP-1巨噬细胞2、8和16h的细胞存活率逐渐下降（P<0.05）;细胞内病毒核酸拷贝数逐渐增多（P<0.01）;可见细胞内自噬小体和病毒颗粒;总细胞凋亡率逐渐增加（P<0.01）;与对照组比较,EV71处理组LC3转化量（LC3-II/LC3-I）逐渐增多,而p62蛋白逐渐减少... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2020年06期 北大核心

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【部分图文】：

RT-qPCR检测THP-1巨噬细胞内病毒核酸浓度

通过Western blot检测细胞自噬相关蛋白表达结果显示，与0 h对比，EV71感染2、8和16 h时cleaved caspase3蛋白表达水平升高，caspase3和Bcl-2蛋白表达降低，差异有统计学意义（P<0.01）。与0 h对比，EV71感染2、8和16 h时cleaved caspase-8、Bak蛋白和Bax蛋白差异无统计学意义（P>0.05）。图3 Hoechst 33342染色观察THP-1凋亡细胞核形态变化

图2 透射电镜检测EV71病毒(KC122766)作用THP-1巨噬细胞的情况2.8 Ac-DEVD-CHO抑制EV71病毒诱导THP-1巨噬细胞的凋亡


本文编号：2951136