补肾健脾固冲方对子宫内膜增生大鼠模型VEGF,BAX,BCL-2作用的实验研究
本文关键词:补肾健脾固冲方对子宫内膜增生大鼠模型VEGF,BAX,BCL-2作用的实验研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:本课题以中医理论为基础,结合现代医学实验研究,建立子宫内膜增生大鼠模型,用补肾健脾固冲中药进行干预,通过观察补肾健脾固冲方对子宫内膜增生大鼠子宫局部活性物质VEGF,BAX,BCL-2含量的影响,分析补肾健脾中药对子宫局部微环境的影响,进而探讨补肾健脾中药治疗青春期功血的作用机理,为临床治疗青春期功血提供更为开阔的治疗思路。方法:本实验选用SD幼年雌性大鼠为研究对象,卵巢去势后雌激素刺激建立子宫内膜增生模型,以戊酸雌二醇、中药补肾健脾固冲方、醋酸甲羟孕酮片和宫血停颗粒为实验用药。将90只未成年雌性大鼠于30日龄,体重90±10g行卵巢摘除手术,其中15只大鼠为假手术组仅行开关腹术,术后注射青霉素三天预防感染,连续五天涂大鼠阴道脱落细胞,无角化细胞即手术成功。手术成功的大鼠隔天灌服戊酸雌二醇共45天,病理提示大鼠子宫内膜增生即为造模成功。将造模成功的大鼠随机分为5组,即模型组、西药组、宫血停组、补肾健脾固冲方高、低剂量组,每组15只。在同种饲养条件下,对造模成功的大鼠灌服实验用药,假手术组和模型组给予等体积去离子水灌服,宫血停组灌以宫血停混悬液12g/kg(浓度约0.6g/ml)、西药组灌以醋酸甲氢孕酮混悬液2mg/kg(浓度约0.1mg/ml)、中药高、低剂量组分别灌以补肾健脾固冲方煎剂,高剂量15 g/kg(生药浓度约1.5g/ml)、低剂量7.5 g/kg(生药浓度约0.75g/ml),分别相当于临床剂量的6.7倍、3.35倍,连续灌药30天后处死,检测相关指标。大鼠左侧子宫用多聚甲醛固定,再脱水包埋,用HE染色法染色,免疫组化法检测子宫局部VEGF和BAX,BCL-2的表达。全部数据的统计分析均在SPSS18.0软件的支持下实现。结果:(1)实验各组大鼠子宫内膜增生情况改善,局部细胞层次减少。(2)补肾健脾固冲方能使子宫内膜VEGF表达明显升高(P0.05);(3)补肾健脾固冲方能使子宫内膜BAX表达明显升高(P0.05),BCL-2表达明显降低(P0.05),BAX/BCL-2比值显著升高(P0.05,且P0.01)。结论:本实验证明了中药补肾健脾固冲方能提高子宫局部VEGF的表达,从而达到修复内膜血管,止血的目的;通过上调BAX/BCL-2的比值,促使异常增生的子宫内膜细胞凋亡,达到改变子宫内膜过度增生的病理状态。提示补肾健脾固冲方具有调节子宫局部活性因子的作用,为本方可改善局部微环境的作用机理提供了实验依据,也为临床运用补肾健脾固冲法治疗青春期无排卵性功血提供了理论支持。
【关键词】:青春期功血 子宫内膜增生 VEGF 细胞凋亡 补肾健脾固冲方
【学位授予单位】:河南中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R285.5;R-332
【目录】:
- 摘要5-7
- Abstract7-9
- 前言9-10
- 材料与方法10-14
- 1 实验材料10-11
- 2 实验方法11-14
- 实验结果14-17
- 1 大鼠子宫组织形态学示14-15
- 2 各组大鼠子宫内膜VEGF表达水平的比较15
- 3 各组大鼠BAX,BCL-2及其比值表达水平的比较15-17
- 理论探讨17-30
- 1 祖国医学对青春期功血的认识17-19
- 2 现代医学对青春期功血的认识19-22
- 3 导师对本病的认识和学术思想探讨22-28
- 4 实验动物的选择28
- 5 实验结果分析及作用机制探讨28-30
- 结论30-31
- 致谢31-32
- 参考文献32-33
- 附录一33-37
- 附录二 文献综述37-42
- 参考文献40-42
【参考文献】
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本文编号:295156
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