组蛋白去乙酰化酶2在衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用

发布时间：2021-01-02 18:19

　　目的探讨组蛋白去乙酰化酶2（histone deacetylase 2,HDAC2）在D-半乳糖（D-galactose）诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用。方法使用D-galactose刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老后,β-半乳糖苷酶染色验证模型是否成功;透射电镜观察未给予D-galactose对照（control）组与给予D-galactose组的自噬情况;Western Blot检测LC3B及p62的蛋白表达;分别采用qRT-PCR与Western Blot检测control组与D-galactose组HDAC2的mRNA与蛋白表达;同时,D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测HDAC2的自身表达及LC3B与p62的蛋白表达,免疫荧光染色观察LC3B的定位及表达;最后,Western Blot检测control组与D-galactose组H3K14ac的蛋白表达;D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测H3K14ac的蛋白表达。结果成功复制了衰老心肌细胞模型;经过D-galactose干预后,细胞内的自噬... 

【文章来源】：实用医学杂志. 2020年09期 北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

电镜观察control与D-galactose组中自噬水平的改变

透射电镜结果显示，正常心肌细胞中可见细胞器膜结构完整，多个自噬小泡包裹待降解底物形成自噬小体结构。而衰老诱导的心肌细胞中，线粒体数量明显增多，少有自噬结构形成，自噬水平降低。见图2。图2 电镜观察control与D-galactose组中自噬水平的改变

为进一步明确HDAC2在衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用，将HDAC2干扰病毒及对照病毒感染衰老心肌细胞后，Western Blot首先验证了病毒感染效率，随后检测了LC3B及p62的蛋白表达，最后通过免疫荧光染色观察LC3B的表达情况。D-galactose组中的Ad-shHDAC2与Ad-shNC相比，HDAC2蛋白表达降低（P<0.05），证实病毒感染成功。同时，干扰HDAC2后LC3BⅡ/Ⅰ明显降低，p62表达水平明显升高（P<0.05），与上述得出的HDAC2与自噬水平之间关系一致。LC3B荧光强度更低，进一步证实了HDAC2的低表达能够促进衰老心肌细胞自噬水平的降低。见图5。图4 control组与D-galactose组中HDAC2的mRNA及蛋白表达

【参考文献】：
期刊论文
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[6]有氧运动通过上调心肌细胞自噬改善衰老心肌收缩舒张功能[J]. 李丽,仝武军,樊荣,殷玥,邢媛,李晨,马恒.  心脏杂志. 2014(01)

博士论文
[1]心肌细胞衰老对心脏重构的影响和调控机制研究[D]. 崔素梅.山东大学 2019



本文编号：2953403