旋毛虫和伪旋毛虫肌幼虫时期排泄分泌产物iTRAQ法蛋白质组学分析

发布时间：2021-01-08 07:58

　　目的探究旋毛虫和伪旋毛虫肌幼虫时期排泄分泌产物（ESP）中的差异蛋白,分析两者免疫抑制差异的原因和参与包囊形成的潜在功能蛋白。方法收集旋毛虫和伪旋毛虫ESP,采用二喹啉甲酸检测法测定旋毛虫、伪旋毛虫ESP蛋白浓度,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测蛋白质量,对经过超滤管酶解法酶解后的ESP多肽段采用同位素相对定量和绝对定量标记技术（iTRAQ）标记,混合标记后的样品进行液相分离高pH反相色谱和液相串联质谱检测。检测完成后,搜索UniProt数据库中的旋毛虫（Trichinella spiralis）和伪旋毛虫（Trichinella pseiudospiralis）数据库,在可信蛋白（得分80以上）的基础上筛选同源蛋白,比较同源蛋白的差异表达情况。利用QuickGO对差异蛋白进行标准化描述。选取9个差异明显的重要蛋白进行实时荧光定量PCR验证,采用△△Ct法验证基因表达水平。采用SPSS 19.0软件进行统计学分析结果经iTRAQ标记鉴定出旋毛虫可信蛋白492个,伪旋毛虫535个,可用于定量分析的旋毛虫蛋白193个,伪旋毛虫蛋白164个。旋毛虫/伪旋毛虫同源比对... 

【文章来源】：中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2020,38(01)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

qRT-PCR验证旋毛虫/伪旋毛虫部分蛋白在基因转录水平的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]旋毛虫成虫排泄分泌物对中性粒细胞功能的影响[J]. 王静,丁静,王春,王学林,白雪,唐斌,杨勇,王光明,刘明远.  中国兽医学报. 2019(03)
[2]两种蠕虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠腹腔渗出细胞一氧化氮产生及细胞因子分泌的影响[J]. 杨小迪,李徽徽,陶志勇,方强,程洋,徐岚松,薛仁敏,陈勇,夏惠,张慧,姜辉,刘涛,彭琨,陈兴智.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2017(02)
[3]旋毛虫成虫排泄分泌蛋白组分分析[J]. 杨小迪,陶志勇,程洋,吴琦,王小莉,宋迪,徐岚松,薛仁敏,常雪莲,张慧,汪瑞,陈兴智,方强.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2017(01)
[4]质谱法分析旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的组分[J]. 罗婧梅,程露阳,关晓东,李丹,于莉,杜娈英.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2016(01)
[5]旋毛虫对宿主免疫应答调节机制的研究进展[J]. 赵葛,杨文涛,王春凤,杨桂连.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2013(02)
[6]定量蛋白质组学分析链霉素耐药和敏感结核分枝杆菌临床分离株[J]. 朱传智,赵雁林,黄香玉,逄宇,赵雅贞,庄玉辉,何秀云.  微生物学报. 2013(02)
[7]旋毛虫成虫与肌幼虫排泄分泌抗原蛋白组分的比较分析[J]. 马鸣旺,张志兰,申丽洁,董明治.  中国生物制品学杂志. 2010(11)
[8]旋毛虫成囊前期幼虫排泄分泌抗原的研究进展[J]. 董明治,申丽洁.  中国病原生物学杂志. 2009(10)



本文编号：2964228