中华按蚊AsBe3基因的克

发布时间：2021-01-16 14:20

　　【目的】克隆中华按蚊（Anopheles sinensis）羧酸酯酶基因AsBe3,并对该基因进行生物信息学和分子对接分析。【方法】克隆AsBe3基因编码序列,并在AsBe3蛋白的理化性质、系统发生关系、二级结构、多重序列比对、系统发育关系等方面对进行了预测和分析;通过同源建模和分子对接,分析AsBe3蛋白与氟氯氰菊酯形成稳定复合物的关键氨基酸残基。【结果】通过克隆得到了编码AsBe3基因的序列,大小为1 302bp。在系统发育关系方面,AsBe3蛋白在8种不同物种中具有很高的保守性。AsBe3蛋白是疏水性蛋白,相对分子质量为48.45kDa,无信号肽和跨膜区。氟氯氰菊酯与AsBe3蛋白的结合自由能约为-42.3kJ·mol^-1,理论上AsBe3蛋白能够代谢氟氯氰菊酯。【结论】研究结果为后续对AsBe3基因进行生物学功能研究奠定了基础,为下一步开展AsBe3蛋白代谢研究提供了基础数据,也为阐释羧酸酯酶代谢抗性的分子机制提供了理论依据。 

【文章来源】：重庆师范大学学报(自然科学版). 2020,37(03)北大核心

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【部分图文】：

AsBe3的疏水区预测

以中华按蚊cDNA为模板进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳检测后，回收目的条带，进行连接转化，阳性菌液经测序验证后，最终分子克隆得到AsBe3基因。图1显示，AsBe3基因编码区为1 302bp，共编码433个氨基酸。2.2 同源性序列比对

经分析后得到的AsBe3蛋白的理化性质如表2所示。从表2中的不稳定系数可知，该蛋白不稳定。此外图4显示，AsBe3蛋白中Leu所占比例最大，达11.8%。图3 8个物种Be3蛋白的系统发育树

【参考文献】：
期刊论文
[1]中华按蚊对常用杀虫剂的抗药性监测[J]. 张华勋,李凯杰,胡乐群,袁方玉,裴速建,肖斌,余品红.  中国热带医学. 2010(04)



本文编号：2980982