活血消瘿片对缺碘性甲状腺肿模型大鼠影响的实验性研究

发布时间：2017-04-11 05:22

  本文关键词：活血消瘿片对缺碘性甲状腺肿模型大鼠影响的实验性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:初步探究缺碘性甲状腺肿实验动物模型的制备;观察活血消瘿片对缺碘性甲状腺肿模型大鼠甲状腺功能和重量的影响;检测实验大鼠相关细胞因子的水平,从血管生成和细胞凋亡的角度探讨甲状腺肿的发病机制及活血消瘿片的治疗影响机制;为证实活血消瘿片在治疗甲状腺肿上的确切疗效提供相关实验数据,进一步推广其在临床上的应用。方法:1.缺碘性甲状腺肿大鼠实验模型的制作备份:选用4周龄的健康SPF级Wistar大鼠共100只,体重约90-110g,雌鼠和雄鼠各占一半,按照随机的方式分成五组,即正常组、模型对照组、活血消瘿片组、L-T4组以及联合组(活血消瘿片加L-T4),每组各有20只,参考相关文献关于缺碘性甲状腺肿大鼠模型的造模方法[1,2],并结合预实验中的相关造模结果,对5组大鼠进行造模处理,其中正常组予普通大鼠饮食和双蒸馏水饲养,剩余四组大鼠均采用由缺碘地区所产的粮食作物加工配制成的低碘饲料进行喂养,并饮用去离子水,碘含量为30-40μg/kg,喂养3个月。2.给药:为排除喂养过程中食物水源中含碘造成的干扰因素,在实验结束前,正常组继续喂以普通大鼠饮食及双蒸馏水,其余各组大鼠继续以低碘饲料和去离子水进行喂养,其中正常组和模型组作为对照不给予药物治疗,活血消瘿片组予活血消瘿片粉剂10mg/g.d,L-T4组予L-T4水溶液0.2ug/kg.d,联合组予活血消瘿片粉剂5mg/g.d和L-T4水溶液0.1ug/kg.d,治疗过程为3个月,最后1次给药前1天禁食,饮水不变。3.标本的采集及数据记录(血液标本及甲状腺组织称重):最后一次给药1小时后,各组大鼠2%利多卡因0.2ml/100g腹腔麻醉后,通过腹主动脉采血的方式,每只大鼠各收集4管,每管3-5ml,滴入5ml eppendorf管中,并作好标记,放置于3000r/min离心机上离心10分钟后,分离血清,将EP管平稳放到零下20℃冰箱中以备检测。钝性分离实验大鼠的甲状腺组织,用滤纸吸干甲状腺组织中的液体,放置精密电子天平中称量,记录数据,后人道处死大鼠。4.放免法检测甲状腺功能:包括游离三碘甲腺原氨酸(ft3)、游离甲状腺素(ft4)、促甲状腺激素(tsh),由湖北省中医院花园山院区核医学科负责检测;5.双抗体夹心酶联免疫分析法(elisa)检测大鼠血清vegf水平;6双抗体夹心酶联免疫分析法(elisa)检测大鼠血清sfas、sfasl水平;7.观察指标:比较治疗后治疗组与对照组甲状腺质量的差异、血清ft3、ft4、tsh差异以及血清vegf、sfas、sfasl的差异。结果:1.甲状腺组织重量的结果表示:与正常组对照,模型对照组中大鼠的甲状腺重量显著上升(p0.01),从而说明通过控制大鼠每日的碘摄入量来制备缺碘性甲状腺肿大鼠模型的方法是可行的,本次动物模型的制备成功;l-t4组和活血消瘿片组中的甲状腺重量与模型组对比呈下降趋势,但无明显的统计学意义;与模型组对照,联合组的甲状腺重量明显下降(p0.05),差异具有统计学意义。说明联合用活血消瘿片和l-t4治疗缺碘性甲状腺肿的效果要优于两药单用。2.甲状腺功能的结果表示:与正常组比较,模型组大鼠ft3、ft4均下降,tsh上升(p0.01),呈现甲减的状态;与模型组相比,活血消瘿片组中甲状腺功能的变化不明显,无统计学意义;与模型组相比,l-t4组及联合组ft3、ft4上升,tsh显著下降(p0.05),有统计学意义。3.大鼠血清vegf浓度的检测结果显示:与正常组比较,模型组大鼠血清vegf的浓度明显上升(p0.01);与模型组比较,用药组大鼠的血清vegf浓度均有下降(p0.01);与优甲乐组比较,活血消瘿片组及联合用药组大鼠血清vegf浓度无显著差异(p0.05)。结果表明,优甲乐与活血消瘿片均可以通过适度下调血清vegf水平,而联合用药下降的幅度更为明显。4.大鼠血清sfas、sfasl浓度的检测结果显示:与模型组比较,联合用药组大鼠血清sfas浓度明显下降(p0.01),而优甲乐组及活血消瘿片组有所下降,但无统计学差异(p0.05);与模型组比较,联合用药组大鼠血清sfasl浓度明显上升(p0.01),其高于优甲乐组及活血消炎片组(p0.05),亦高于正常组(p0.05),与模型组比较,优甲乐组及活血消瘿片组大鼠血清sfasl浓度亦均有所上升(p0.05)。结论:1.活血消瘿片有抗甲状腺肿大的作用,相对于l-t4来说,对于甲状腺功能的影响较小,说明活血消瘿片不良反应少,安全性更高。2.血管内皮生长因子vegf在甲状腺肿的发病过程中以及治疗的转归发挥着重要的意义,而活血消瘿片抑制甲状腺组织增生肥大的机制可能是通过下调血清vegf的浓度来达到的。3.凋亡因子(sfas、sfasl)与甲状腺肿的发病进展以及治疗转归有着密切关联,活血消瘿片能够通过降低血清sfas浓度,升高血清sfasl的浓度,刺激甲状腺细胞凋亡的活跃,从而实现抑制甲状腺肿甚至缩小肿大甲状腺组织的目的。
【关键词】：活血消瘿片 缺碘性甲状腺肿 细胞因子 动物实验
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 中英文缩略词表12-13
• 前言13-17
• 第一部分 活血消瘿片对缺碘性甲状腺肿大鼠模型甲状腺功能及重量的影响17-22
• 1.材料和试剂17
• 1.1 药物试剂17
• 1.2 试剂耗材17
• 2.仪器设备17
• 3.实验方法17-18
• 3.1 实验动物17-18
• 3.2 模型制备及分组18
• 3.3 治疗给药18
• 3.4 标本采集及甲状腺剥离18
• 3.5 分析统计18
• 4.结果18-19
• 5 讨论19-22
• 第二部分 活血消瘿片对缺碘性甲状腺肿模型大鼠生长因子VEGF的影响22-27
• 1.材料试剂22
• 1.1 药物试剂22
• 1.2 试剂耗材22
• 2 仪器设备22
• 3 实验方法22-24
• 3.1 实验动物22
• 3.2 模型制备及分组22-23
• 3.3 治疗给药23
• 3.4 血液标本采集23
• 3.5 VEGF-ELISA试验方法23-24
• 3.6 分析统计24
• 4 结果24-25
• 5 讨论25-27
• 第三部分 活血消痰方对结甲患者凋亡因子(sFas、sFasL)的影响27-34
• 1.材料和试剂27
• 1.1 药物试剂27
• 1.2 试剂耗材27
• 2 仪器设备27
• 3 实验方法27-30
• 3.1 实验动物27
• 3.2 模型制备及分组27-28
• 3.3 治疗给药28
• 3.4 血液标本采集28
• 3.5 sFas-ELISA试验方法28-29
• 3.6 sFasL-ELISA试验方法29-30
• 3.7 分析统计30
• 4 结果30-31
• 5 讨论31-34
• 讨论34-41
• 结语41-42
• 参考文献42-47
• 附录-文献综述47-56
• 参考文献54-56
• 致谢56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：298417