人源性长寿保障基因2对脂多糖诱导的PC12细胞损伤的影响

发布时间：2021-01-22 22:08

　　目的探讨沉默人源性长寿保障基因2（LASS2）基因对脂多糖（LPS）诱导的PC12细胞活力、凋亡及核转录因子kappaB（NF-κB）信号通路的影响。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞分为4组:空白组（无任何处理）、LPS组(200μg·mL^-1 LPS处理PC12细胞)、LPS+NC组(转染阴性对照siRNA质粒后用200μg·mL^-1LPS处理)、LPS+si-LASS2组(转染LASS2的特异性siRNA质粒后用200μg·mL^-1LPS处理)。以蛋白质印迹法检测LASS2、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved caspase-3）和环氧化酶-2（COX-2）蛋白表达。细胞检测试剂盒-8和流式细胞术分别检测细胞活力（OD值）与凋亡率。活性氧（ROS）试剂盒检测ROS含量（相对荧光强度）。结果空白组、LPS组、LPS+NC组、LPS+si-LASS2组的LASS2蛋白相对表达量分别为0.11±0.01,0.80±0.07,0.79±0.06和0.16±0.02;... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(02)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        细胞
        试剂
        仪器
    2 实验方法
        2.1 细胞培养[5]
        2.2 分组与处理[3]
        2.3 以蛋白质印迹法检测LASS2、p-NF-κB、Cleaved caspase-3和COX-2蛋白表达水平[6]
        2.4 以CCK-8检测细胞活力[7]
        2.5 以流式细胞仪检测细胞凋亡率[7]
        2.6 以ROS试剂盒检测细胞内ROS水平[7]
    3 统计学处理
结 果
    1 几组PC12细胞沉默LASS2基因效果比较
    2 经LPS刺激PC12细胞后对LASS2蛋白相对表达量的影响
    3 沉默LASS2表达对LPS诱导的PC12细胞活力影响
    4 沉默LASS2表达对LPS诱导的PC12细胞凋亡和活性氧（ROS）水平的影响
    5 沉默LASS2表达对LPS诱导的PC12细胞COX-2蛋白表达的影响
    6 沉默LASS2表达对LPS诱导的PC12细胞p-NF-κB和Cleaved-caspase3表达的影响
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]肉豆蔻木酚素对脂多糖激活的小胶质细胞条件培养基对海马神经元损伤的保护作用[J]. 宗堪堪,刘鑫,玄延花,金昱,崔春爱.  中国临床药理学杂志. 2019(06)
[2]右美托咪定对脂多糖刺激后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用及机制[J]. 周俊杰,肖伟,何璇,彭娜,童华生,苏磊.  解放军医学杂志. 2018(04)
[3]α-细辛醚对脂多糖诱导大鼠小胶质细胞炎症反应的影响[J]. 徐燕,苗静琨,刘辉娟,花媛媛,马倩,李春,包蕾,陈启雄.  中国临床药理学杂志. 2017(02)



本文编号：2993988