H5N1流感病毒疫苗株（NIBRG-14）在MDCK-G1细胞上的遗传稳定性

发布时间：2021-01-25 20:42

　　目的分析H5N1流感病毒疫苗株（NIBRG-14）在MDCK-G1细胞上的遗传稳定性。方法将H5N1种子毒株在MDCK-G1细胞上传代,收获病毒液作为P2病毒,继续传至P15,每隔5代[即P1（原代）、P5、P10、P15]进行测序。分别以含不同浓度（1、2、4μg/mL）TPCK-trypsin的培养基及不同病毒接种MOI（1、0. 1、0. 01、0. 001、0. 000 1、0. 000 01）在MDCK-G1细胞上培养P1 H5N1病毒,检测血凝滴度,计算CCID50,确定最适MOI及TPCK-trypsin浓度。将P1和P15 H5N1病毒接种鸡胚,收获尿囊液,经Sepharose 4 Fast Flow凝胶柱层析法纯化病毒后,进行电镜观察;采用培养法和指示细胞培养法（DNA染色法）检测支原体。结果 H5N1流感病毒疫苗株（NIBRG-14）在MDCKG1细胞传代过程中血凝滴度增加,从1∶128升至1∶1 024,P1、P5、P10和P15 H5N1种子病毒8条基因序列（PB1、PB2、PA、HA、NP、NA、M、NS）经DNAMAN比对结果一致。H5N1种子病毒株在MDC... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020,33(02)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同TPCK-trypsin浓度下CCID50变化曲线

P1、P5、P10、P15 H5N1流感病毒种子病毒8条基因片段对比

不同MOI接种H5N1流感病毒时血凝滴度变化曲线

【参考文献】：
期刊论文
[1]流感病毒在MDCK细胞上培养条件的优化分析[J]. 周大宇,李春,赵晓辉,孙佩龙,张旭,毛玲玲.  现代预防医学. 2015(18)



本文编号：2999863