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可见分光光度法测定α-淀粉酶活力

发布时间:2021-01-28 01:27
  利用I-3与淀粉络合所呈现的蓝色在一定波长下有特征吸收这一特性,采用可见分光光度法,通过测定添加α-淀粉酶前后发生水解的淀粉量的变化测定α-淀粉酶活力。结果表明,淀粉与I-3在pH值6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中显色良好,并在580 nm处具有最大吸光度。加入一定量的淀粉,α-淀粉酶浓度(x)在0.001~0.008 mg·mL-1范围内与酶活力(y)线性关系良好,标准曲线方程为y=375.75x+0.1208(R2=0.9939)。因此,可以利用碘与淀粉的显色反应对α-淀粉酶活力进行测定。 

【文章来源】:化学与生物工程. 2020,37(03)

【文章页数】:4 页

【部分图文】:

可见分光光度法测定α-淀粉酶活力


吸收光谱

淀粉,吸光度,浓度


根据Lambert-Beer定律,采用紫外可见分光光度法对物质含量进行测定时,吸光度应控制在0.2~0.8之间[9],一般不宜超过1.0,否则测定结果将会产生较大偏差。故而在本实验中,参照1.3.2项下方法,分别配制不同浓度的淀粉溶液,与过量的碘液充分显色后测定其吸光度,结果如图2所示。由图2可以看出,当淀粉浓度在0.001~0.008 g·mL-1时,淀粉与碘所形成的络合物在580 nm处所产生的特征吸收与淀粉浓度呈正相关性。以淀粉浓度(c)为横坐标、吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线,得标准曲线方程:A=129.49c+0.0097,R2=0.9962,线性关系良好。表明淀粉浓度在0.001~0.008 g·mL-1范围内,可以利用碘与淀粉的显色反应对淀粉含量进行测定。

变化曲线,酶活力,浓度,淀粉酶


从图3可以看出,当α-淀粉酶浓度在0.001~0.008 mg·mL-1之间时,酶活力(y)与α-淀粉酶浓度(x)线性关系良好,拟合标准曲线方程为:y=375.75x+0.1208,R2=0.9939。表明α-淀粉酶浓度在0.001~0.008 mg·mL-1范围内,可以利用碘与淀粉的显色反应对酶活力进行测定。2.3.3 方法学考察


本文编号:3004106

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