PPARδ在小鼠成肌细胞分化过程中对肌纤维类型的影响
发布时间：2021-02-09 21:41
目的:通过小鼠成肌细胞分化过程中添加PPARδ特异性激动剂GW0742和拮抗剂GSK0660的方法,研究小鼠成肌细胞分化过程中肌球蛋白重链（MHC）亚型的表达水平,进一步探讨PPARδ在成肌细胞分化过程中对肌纤维类型的影响。方法:培养C2C12成肌细胞株和新生昆明小鼠原代成肌细胞。各自分为三组,分别为对照组（DMSO组）、PPARδ激动剂组（GW0742组）、PPARδ拮抗剂组（GW0742+GSK0660组）。培养各组细胞至90%左右汇合度时,C2C12细胞株换生长培养基（DMEM培养基+10%FBS）为分化培养基（DMEM培养基+2%HS）,小鼠原代成肌细胞换生长培养基（F10培养基+20%FBS+5ng/ml鼠bFGF）为分化培养基（DMEM培养基+2%HS）;分别在C2C12成肌细胞株分化培养基培养的第4、8、12天和昆明小鼠原代成肌细胞分化培养基培养的第2、4、6天收取细胞样品;MHC免疫荧光鉴定成肌细胞分化情况;q-RT-PCR检测MHC各亚型和PPARδ表达情况。结果:（1）C2C12成肌细胞分化第4天,MHC免疫荧光可见有肌管形成,三组细胞分化形成的肌管数量大致相当;分...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中英文缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
1.材料与方法
1.1 细胞株与动物及来源
1.2 试剂
1.3 q-RT-PCR引物
1.4 实验用仪器
1.5 试剂配制方法
1.6 实验方法
1.6.1 PPARδ在C2C12成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
1.6.2 小鼠原代成肌细胞的提取、纯化和鉴定
1.6.3 PPARδ在原代成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
1.7 统计方法
2.结果
2.1 PPARδ在C2C12成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
2.1.1 各组C2C12成肌细胞在4、8、12天的生长分化情况
2.1.2 细胞培养不同时期MHC免疫荧光结果
2.1.3 q-RT-PCR检测各肌纤维亚型在不同时期的表达结果
2.2 小鼠原代成肌细胞的鉴定
2.3 PPARδ在小鼠原代成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
2.3.1 各组原代成肌细胞在2、4、6天的生长分化情况
2.3.2 原代成肌细胞MHC免疫荧光染色结果
2.3.3 q-RT-PCR检测原代成肌细胞各肌纤维亚型表达结果
3.讨论
4.结论
参考文献
综述 PPARδ在相关疾病中作用的最新研究
参考文献
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]肌纤维类型转化的分子信号通路及其营养调控进展[J]. 郭秋平,文超越,王文龙,段叶辉,李颖慧,李凤娜. 动物营养学报. 2017(06)
[2]小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养[J]. 熊雷,何衍佶,戴威,赵圆,高彦飞,邓忠良,聂茂. 现代医药卫生. 2017(03)
[3]PGC-1α对有氧运动诱导增龄性大鼠骨骼肌纤维转化的调控作用与机理[J]. 陈飞渡,熊萍,汤长发,刘文锋,朱文. 武汉体育学院学报. 2016(06)
[4]大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养鉴定和体外分化特点[J]. 冯永强,李峥,褚万立,郁永辉,马丽,柴家科. 中华医学杂志. 2016 (12)
[5]低频电刺激对低氧高二氧化碳大鼠比目鱼肌肌纤维类型的影响[J]. 黄世园,蒋贤逊,沈洁,王小同. 温州医科大学学报. 2016(03)
[6]Peroxisome proliferator-activated receptor-delta agonist ameliorated inflammasome activation in nonalcoholic fatty liver disease[J]. Hyun Jung Lee,Jong Eun Yeon,Eun Jung Ko,Eileen L Yoon,Sang Jun Suh,Keunhee Kang,Hae Rim Kim,Seoung Hee Kang,Yang Jae Yoo,Jihye Je,Beom Jae Lee,Ji Hoon Kim,Yeon Seok Seo,Hyung Joon Yim,Kwan Soo Byun. World Journal of Gastroenterology. 2015(45)
[7]Six1对骨骼肌发育和肌纤维类型转化的调控[J]. 徐孟,陈小玲,陈代文,余冰,罗钧秋,何军,毛湘冰,虞洁,郑萍,黄志清. 动物营养学报. 2015(07)
[8]神经因素对缺血肢体血管生成和骨骼肌肌纤维重塑的影响[J]. 刁永鹏,郭李龙,连利珊,闫盛,陈厚早,李拥军. 中华医学杂志. 2015 (08)
[9]神经生长因子基因转染对缺血肢体血管生成和骨骼肌纤维重塑的影响[J]. 刁永鹏,郭李龙,连利珊,闫盛,陈厚早,李拥军. 中国普外基础与临床杂志. 2015(02)
[10]牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化[J]. 王轶敏,代阳,刘新峰,刘中伟,李吉霞,郭宏,丁向彬. 中国畜牧兽医. 2014(07)
博士论文
[1]二氢杨梅素调控FLCN-FNIP1/AMPK通路抑制肥胖诱导的骨骼肌纤维类型转换[D]. 周启程.第三军医大学 2017
硕士论文
[1]低强度脉冲超声波对培养小鼠骨骼肌成肌细胞增殖分化的影响[D]. 段青.第三军医大学 2013
本文编号：3026278
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中英文缩略词表
中文摘要
Abstract
前言
1.材料与方法
1.1 细胞株与动物及来源
1.2 试剂
1.3 q-RT-PCR引物
1.4 实验用仪器
1.5 试剂配制方法
1.6 实验方法
1.6.1 PPARδ在C2C12成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
1.6.2 小鼠原代成肌细胞的提取、纯化和鉴定
1.6.3 PPARδ在原代成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
1.7 统计方法
2.结果
2.1 PPARδ在C2C12成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
2.1.1 各组C2C12成肌细胞在4、8、12天的生长分化情况
2.1.2 细胞培养不同时期MHC免疫荧光结果
2.1.3 q-RT-PCR检测各肌纤维亚型在不同时期的表达结果
2.2 小鼠原代成肌细胞的鉴定
2.3 PPARδ在小鼠原代成肌细胞分化过程中对肌纤维亚型的影响
2.3.1 各组原代成肌细胞在2、4、6天的生长分化情况
2.3.2 原代成肌细胞MHC免疫荧光染色结果
2.3.3 q-RT-PCR检测原代成肌细胞各肌纤维亚型表达结果
3.讨论
4.结论
参考文献
综述 PPARδ在相关疾病中作用的最新研究
参考文献
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]肌纤维类型转化的分子信号通路及其营养调控进展[J]. 郭秋平,文超越,王文龙,段叶辉,李颖慧,李凤娜. 动物营养学报. 2017(06)
[2]小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养[J]. 熊雷,何衍佶,戴威,赵圆,高彦飞,邓忠良,聂茂. 现代医药卫生. 2017(03)
[3]PGC-1α对有氧运动诱导增龄性大鼠骨骼肌纤维转化的调控作用与机理[J]. 陈飞渡,熊萍,汤长发,刘文锋,朱文. 武汉体育学院学报. 2016(06)
[4]大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养鉴定和体外分化特点[J]. 冯永强,李峥,褚万立,郁永辉,马丽,柴家科. 中华医学杂志. 2016 (12)
[5]低频电刺激对低氧高二氧化碳大鼠比目鱼肌肌纤维类型的影响[J]. 黄世园,蒋贤逊,沈洁,王小同. 温州医科大学学报. 2016(03)
[6]Peroxisome proliferator-activated receptor-delta agonist ameliorated inflammasome activation in nonalcoholic fatty liver disease[J]. Hyun Jung Lee,Jong Eun Yeon,Eun Jung Ko,Eileen L Yoon,Sang Jun Suh,Keunhee Kang,Hae Rim Kim,Seoung Hee Kang,Yang Jae Yoo,Jihye Je,Beom Jae Lee,Ji Hoon Kim,Yeon Seok Seo,Hyung Joon Yim,Kwan Soo Byun. World Journal of Gastroenterology. 2015(45)
[7]Six1对骨骼肌发育和肌纤维类型转化的调控[J]. 徐孟,陈小玲,陈代文,余冰,罗钧秋,何军,毛湘冰,虞洁,郑萍,黄志清. 动物营养学报. 2015(07)
[8]神经因素对缺血肢体血管生成和骨骼肌肌纤维重塑的影响[J]. 刁永鹏,郭李龙,连利珊,闫盛,陈厚早,李拥军. 中华医学杂志. 2015 (08)
[9]神经生长因子基因转染对缺血肢体血管生成和骨骼肌纤维重塑的影响[J]. 刁永鹏,郭李龙,连利珊,闫盛,陈厚早,李拥军. 中国普外基础与临床杂志. 2015(02)
[10]牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化[J]. 王轶敏,代阳,刘新峰,刘中伟,李吉霞,郭宏,丁向彬. 中国畜牧兽医. 2014(07)
博士论文
[1]二氢杨梅素调控FLCN-FNIP1/AMPK通路抑制肥胖诱导的骨骼肌纤维类型转换[D]. 周启程.第三军医大学 2017
硕士论文
[1]低强度脉冲超声波对培养小鼠骨骼肌成肌细胞增殖分化的影响[D]. 段青.第三军医大学 2013
本文编号：3026278
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