单细胞技术在造血系统研究中的应用

发布时间：2021-02-20 17:33

　　近年来,单细胞生物学领域的相关研究引起了科学家们的广泛关注。单个细胞分离相关的技术、单细胞测序技术手段的迅速发展,尤其为精准、可靠解析造血细胞的异质性提供了强有力的生物学手段。造血干细胞作为一类研究最为深入的组织特异性干细胞,可产生所有成熟的血细胞类型,且具有自我更新能力。对于这群具有高度异质性的群体,单细胞水平的研究不可或缺。本研究团队新近发展了单细胞Index sorting技术,并运用该流式技术研究了小鼠胚胎生血内皮细胞。前期积累的大量造血干细胞（Hematopoietic Stem Cell,HSC）发育全程的单细胞转录组测序数据,为进一步发掘并富集出生血内皮群体提供了重要的线索。前期研究发现表面分子CD47表达在部分AGM区血管内皮细胞以及所有pre-HSC（造血干细胞前体）上,分别通过富集CD47-、CD47+的内皮细胞和pre-HSC,经过体外诱导孵育结合小鼠移植实验发现,具有造血干细胞活性的细胞均富集在CD47+细胞群体中,提示CD47可进一步用作标记发育阶段更早的造血干细胞相关群体。本研究中,应用流式细胞Index Sorting技术的可回溯性功能,即在上述分选群体标... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一章 单细胞分选技术的建立
    1.1 单细胞分选装置
        1.1.1 BD FACSAriaⅡ开机程序
        1.1.2 质控操作
        1.1.3 单细胞分选样品制备
        1.1.4 喷嘴的选取
        1.1.5 液流的监视
        1.1.6 手动调节液滴延迟
        1.1.7 分选角度调整
    1.2 分选
        1.2.1 分选前调试
        1.2.2 分选后细胞纯度的检测
        1.2.3 微孔板分选
        1.2.4 index sorting分选
第二章 单细胞分选技术精确鉴定生血内皮细胞群体
    2.1 材料方法
    2.2 结果
        2.2.1 单细胞Index Sorting原理及使用
+内皮细胞具有生血潜能">        2.2.2 KIT⁺内皮细胞具有生血潜能
        2.2.3 表面分子CD47显著富集生血内皮细胞
    2.3 讨论
第三章 单细胞分选小鼠骨髓造血干细胞及功能验证
    3.1 材料与方法
    3.2 结果
        3.2.1 小鼠骨髓造血干细胞单细胞直接移植方法的建立
        3.2.2 小鼠骨髓单细胞移植五系检测
        3.2.3 小鼠骨髓造血干细胞单细胞移植后体内重建分析
    3.3 小结
第四章 结论与展望
参考文献
发表论著
作者在学期间取得的学术成果
主要简历
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]全基因组扩增技术原理及研究进展[J]. 潘孝明,梁兴国.  生物技术通报. 2014(12)
[2]单细胞转录组高通量测序分析新进展[J]. 文路,汤富酬.  遗传. 2014(11)
[3]下一代测序技术在表观遗传学研究中的重要应用及进展[J]. 沈圣,屈彦纯,张军.  遗传. 2014(03)
[4]单细胞转录组研究进展[J]. 周超平,李鑫辉.  生物化学与生物物理进展. 2013(12)
[5]转录组研究新技术:RNA-Seq及其应用[J]. 祁云霞,刘永斌,荣威恒.  遗传. 2011(11)



本文编号：3043102