制备人间充质干细胞源细胞外微囊条件探索

发布时间：2021-02-23 04:16

　　目的:探讨制备人间充质干细胞（mesenchymal stem cell, MSC）来源的细胞外微囊（extracellular microvesicle, MV）的适宜条件。方法:无血清条件下培养人脐带来源MSC,细胞融合达80%时,用基础培养液培养72 h后,收集培养细胞的上清,使用浓缩试剂浓缩细胞外微囊,经流式细胞术及电子显微镜鉴定,以蛋白总量为微囊含量指标。调整上清不同pH值,探测MV收获量。去营养后,收集不同培养时间的培养上清,富集微囊并测定蛋白含量,确定不同培养时间微囊产量。结果:富集的细胞外微囊表达CD9、CD63和CD81,电子显微镜下微囊呈圆形,直径在100 nm左右。使用微囊富集试剂盒收集、培养上清pH值分别为3,7和9时,每10⁷个MSC收获的蛋白量分别为416.8±128.1、255.4±77.9和142.8±46.4μg,3组比较有明显差异（P<0.05）。饥饿培养48、72和96 h,每10⁷个MSC收获的蛋白量分别为173.6±44.5、262.4±49.6和364.2±37.8μg,3组存在显著差异（P&... 

【文章来源】：中国实验血液学杂志. 2020,28(04)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料和方法
    试剂与仪器
    细胞培养
    MSC-MV的收集
    蛋白浓度测定
    MSC-MV细胞表面分子标记物的流式细胞术检测
    电子显微镜观察MSC-MV
    统计学分析
结果
    MSC-MV的鉴定
    上清pH值对收获MSC-MV量的影响
    饥饿时间对MSC-MV收获量的影响
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]间充质干细胞防治移植物抗宿主病的研究进展[J]. 王利,马得勋,刘书锋,高春记.  中国实验血液学杂志. 2019(01)
[2]人骨髓间充质干细胞释放膜微囊条件探索[J]. 毕晓云,黄舒,陈晶砺,王芳,王燕,郭子宽.  中国实验血液学杂志. 2014(02)
[3]间充质干细胞来源微泡的研究进展[J]. 王晓庆,朱晓健,邹萍.  中国实验血液学杂志. 2013(01)
[4]释放膜微粒:间充质干细胞治疗的新机制[J]. 李志勇,郭子宽,郭志坤.  组织工程与重建外科杂志. 2012(03)
[5]间充质干细胞临床试验中的问题及其解决策略[J]. 张薇薇,郭子宽,李占全.  中国实验血液学杂志. 2007(04)



本文编号：3047003