EBER原位杂交和免疫组化双染中酶消化和抗原修复的优化

发布时间：2021-02-28 20:54

　　<正>原位杂交和免疫组化双染技术是在不同层次来检测同一细胞上某些物质的表达是否有相关性的一种实验方法。由于操作步骤复杂,实验不易取得理想效果。我科结合本实验室实际情况,经过反复摸索,获得满意效果,现将我科经验总结如下。1材料与方法1.1标本来源收集广东省人民医院病理科2019年1～5月EBER阳性病例16例,其中NK/T淋巴瘤8例,Burkitt淋巴瘤2例,血管免疫母细胞性淋巴瘤4例,浆母细胞性淋巴瘤1例,淋巴结外周T细胞淋巴瘤1例。所有标本均及时固定及规范化取材,经10%中性福尔马林固定。 

【文章来源】：临床与实验病理学杂志. 2020,36(09)北大核心

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【部分图文】：

EBER与CD3双染，原位杂交和免疫组化双染

图1 EBER与CD3双染，原位杂交和免疫组化双染酶消化是原位杂交检测成功与否的关键步骤。其目的是去除靶核酸周围的蛋白质,增加组织的通透性,暴露靶基因,有利于探针渗透,增强杂交信号强度[5]。在单纯性的EBER原位杂交检测中,试剂盒推荐的酶消化时间为30 min,但作者发现,在EBER原位杂交和免疫组化双染实验中,如果先消化30 min后免疫组化再稍加修复,免疫组化染色大部分没信号或信号极弱,细胞结构往往不完整,呈修复过度状态;如果免疫组化不修复,细胞结构比较完好,但免疫组化染色太弱或没信号,达不到染色要求。经过反复摸索,作者首先就不同的酶消化时间对EBER原位杂交结果的影响进行比较,发现酶消化12、16、20 min,EBER原位杂交染色信号均够强,背景干净,达到染色要求。

【参考文献】：
期刊论文
[1]EBV感染相关性疾病的研究现状[J]. 陈秋雨,韩艳秋.  中华医院感染学杂志. 2019(07)
[2]皮肤T/NK细胞EB病毒感染淋巴组织增殖性疾病及NK/T细胞淋巴瘤[J]. 张燕林,韦萍,谢建兰,郑媛媛,周小鸽.  临床与实验病理学杂志. 2018(10)
[3]EB病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识[J]. 谢正德,刘春艳,艾军红.  中华实验和临床病毒学杂志. 2018 (01)
[4]原位杂交与免疫组化双染法在淋巴瘤诊断中的应用[J]. 滕孝静,王卫东,谢建兰,周小鸽.  临床和实验医学杂志. 2013(14)



本文编号：3056443