低氧对小鼠生精小管的损伤作用及对精母细胞凋亡的诱导作用

发布时间：2021-03-07 15:31

　　目的探讨低氧暴露下小鼠生精小管病理损伤情况以及低氧对小鼠精母细胞（GC-2spd, GC-2）细胞凋亡的影响。方法 40只3周龄雄性Balb/c小鼠按照Excel Random函数随机分为常氧组、低氧15、30、60 d组,低氧各组小鼠分别暴露于模拟海拔6 000 m低压舱中减压15、30、60 d,常氧组在平原（海拔300 m）喂养,减压结束后取睾丸组织,HE和TUNEL染色检测睾丸生精小管的病理损伤;将体外培养的GC-2spd细胞,随机分为低氧组和常氧组,低氧组细胞置1%氧和5%二氧化碳低氧培养箱中培养48、60和72 h,常氧组置21%氧和5%二氧化碳培养箱中培养48、60和72 h。采用流式细胞技术、TUNEL检测法、培养液上清乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase, LDH）活性测定和培养液caspase-3/8/9活性测定等方法来检测GC-2细胞凋亡情况。结果低氧15、30、60 d组小鼠睾丸生精小管生精细胞凋亡率分别为（37.2±5.4）%、（66.3±6.4）%、（73.5±8.2）%,均显著高于常氧组凋亡率（4.6±1.4）%,P<0.01,流式细... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(06)北大核心

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【部分图文】：

模拟高原6 000 m低氧对小鼠睾丸生精小管病理损伤的影响

本课题组建立了1%O2暴露下的GC-2细胞凋亡模型,流式细胞术结果表明,分别与21%O2暴露48、60、72 h组比较,1%O2氧暴露48、60、72 h组GC-2细胞凋亡率分别显著升高,且差异具有显著性(P<0.01),见图2。激光共聚焦观察发现(200×),分别与21%O2暴露48、60、72 h组比较,1%O2氧暴露48、60、72 h组凋亡GC-2细胞数/视野分别显著增多,见图3。2.3 低氧对GC-2细胞培养上清中LDH的影响

细胞膜破坏是细胞凋亡起始环节,细胞膜破坏后,细胞质内的酶特别是酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase, LDH)释放到培养液里,通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。结果表明,与21%O2暴露48 h组比较,1%O2暴露48 h组GC-2细胞培养液中LDH值显著升高且差异具有显著性(P<0.01,图4)。图4 低氧对GC-2细胞LDH活性影响


本文编号：3069367