金黄色葡萄球菌金属磷酸酶的遗传特征分析及功能鉴定

发布时间：2021-03-12 07:39

　　目的对金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）一种新型金属磷酸酶（metallophosphatase,MPP）SA1662进行遗传特征分析及生物学功能鉴定。方法从金葡菌基因组DNA中克隆SA1662基因,通过序列比对和构建进化树分析其遗传特征;构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经Ni柱纯化后,测定酶活性。应用同源重组技术构建SA1662基因缺失株,分析SA1662基因缺失对金葡菌生长、万古霉素敏感性、细菌自溶性和细菌生物菌膜形成的影响,探讨SA1662的生物学功能。结果 SA1662蛋白具有MPP类蛋白结构域,并含有特征性金属离子结合位点,与金葡菌和施维茨葡萄球菌中相关蛋白有更近的亲缘关系。该蛋白酶活性依赖于Mg²⁺和Mn²⁺,特别是Mg²⁺。与野生型菌株相比,SA1662基因缺失后,细菌生长速度减慢,万古霉素敏感性、TritonX-100诱导下的细菌自溶性和细菌生物菌膜形成能力均下降。结论 SA1662蛋白为一种新型的金葡菌MPP,在细菌抗逆性中起着重要作用。 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020,33(02)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

金葡菌SA1662和不同细菌已知金属磷酸酶的比对

SA1662基因缺失株对万古霉素的敏感性

0 SA1662基因缺失株的自溶性

【参考文献】：
期刊论文
[1]金黄色葡萄球菌重要毒力因子的功能及其抑制剂研究进展[J]. 陈菲菲,狄红霞,蓝乐夫.  科学通报. 2013(36)



本文编号：3077942