UPR-IRE1α 信号轴经由p38 MAPK通路干预肌纤维免疫特性

发布时间：2021-03-25 04:17

　　背景:骨骼肌细胞呈现免疫学特性,主动参与局部免疫应答。它们能够通过主要组织相容性复合物呈递抗原,并能够分泌可溶性肌细胞因子,这些分子以促炎或抗炎方式主动参与损伤肌组织修复再生过程以及炎性肌病的病理过程。了解骨骼肌细胞免疫学特性有助于确定肌损伤与炎性肌病的新治疗靶点。非折叠蛋白反应（Unfolded Protein Responses,UPR）是一种适应性反应,旨在恢复内质网应激条件下内质网的稳态。研究表明UPR的功能超出了其传统认定功能,并与其他功能相交叉,如先天免疫和抗原呈递。UPR也被认为参与骨骼肌的修复再生过程,并调节肌肉的重塑。那么,炎性刺激诱发的肌纤维UPR是否直接影响肌纤维自身的免疫特征?具体由哪些UPR通路参与对肌纤维免疫功能的调节?目前尚无相关的研究报道。目的分析急性肌损伤诱导的炎性环境以及体外炎性刺激对肌组织和肌细胞内UPR的影响;明确UPR对体外炎性刺激诱导的肌细胞免疫表型的影响并进一步分析UPR影响肌细胞免疫表型的机制。方法采用qRT-PCR等分析心脏毒素（cardiotoxin,CTX）诱导的急性肌损伤以及体外炎性刺激与肌细胞UPR-IRE1α轴活化的相关性;应... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．内质网应激的启动机制??Ｆｉｇｕｒｅ?１．?Ｔｈｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ＥＲ?ｓｔｒｅｓｓ??

?第一章急性损伤以及体外炎性刺激导致肌细胞内ＵＰＲ被激活???环节。我们采用广泛被报道的胫骨前肌肌内注射ＣＴＸ的方法构建肌损伤小鼠模??型，Ｈ＆Ｅ染色和免疫荧光Ｌａｍｉｒｉｉｎ２ａ染色观察肌肉的损伤程度。结果显示（图??１－１）：?ＣＴＸ肌内注射４天时，肌细胞细胞膜遭到破坏、正常结构消失，局部大??量细胞核聚集，表明组织细胞溶解、溃变，局部淋巴细胞渗出明显；ＣＴＸ肌内??注射７天时，大量聚集的细胞核明显减少，中央核细胞增多，表明损伤组织内??淋巴细胞渗出减少，再生肌细胞増多，肌组织进入修复再生期；ＣＴＸ肌内注射??１０天时，少量出现聚集的细胞核，中央核细胞较１０天时增大，表明渗出的淋巴??细胞大部分己消失，肌细胞进一步修复；ＣＴＸ肌内注射１４天时，聚集的细胞核??基本消失，中央核细胞进一步增大，且部分己成熟为周边核细胞，表明损伤肌??组织炎症渗出己消失，且组织基本完成修复。以上结果表明：采用ＣＴＸ?（５０?ｐＬ，??５（Ｈｌｇ／ｍＬ）肌内注射可以成功制备急性肌损伤模型，在此基础上可以进行后续实??验。??ｄ０?ｄ４?ｄ７?ｄｌＯ?ｄ?１４??

?博士学位论文???则在７天时显著升高，之后下降至正常水平。采用蛋白免疫印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ）??检测肌损伤后４天、７天、１０天、丨４天胫骨前肌蛋白提取物中ＡＴＦ６、ｐ－ＩＲＥｌａ??和ｐ－ｅＩＦ２ａ。结果显示（图１－３）：损伤后４天，ＡＴＦ６ａ明显上调，其上调趋势持??续至７天，随后下调至１４天恢复正常水平；ｐ－ｅＩＦ２ａ、ｐ－ＩＲＥｌ在损伤后呈上调趋??势，至７天和１０天时与非损伤组有明显差异，１４天时，与非损伤组相比呈现升??高趋势但无统计学差异。以上结果表明：ＵＰＲ在急性肌损伤过程中可活化，且??随着再生修复过程的完成而逐渐减退。??２２－?■?ＡＴＦ４??Ｏｄａｙ?４ｄａｙ?７ｄａｙ?ｌＯｄａｙ?＜?９?ＡＴＦ６??


本文编号：3099009