幽门螺旋杆菌hpaA-cagA融合基因在乳酸球菌中的表达及免疫原性研究
发布时间：2021-03-27 19:52
幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori）是1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜中分离成功,是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种类。据不完全统计,全球有近50%的人口感染或携带幽门螺旋杆菌。通常情况下采用抗生素和质子泵抑制剂治疗,也取得了相对不错的效果,但抗生素的耐药性、治疗费用昂贵、治愈后再复发等因素成为影响治疗不可忽视的因素,治疗性疫苗的研究已经成为攻克幽门螺旋杆菌感染的必然趋势。本实验从消化性胃溃疡患者的胃组织中分离得到幽门螺旋杆菌并进行特异性鉴定后,对幽门螺旋杆菌增殖培养基组分进行响应面优化研究,提高幽门螺旋杆菌产量的同时便于后续研究。提取幽门螺旋杆菌基因组DNA并特异性扩增黏附素基因（Helicobacter pylori adhesin A,hpaA）和细胞毒素相关基因A（Cytotoxin-associated gen A,cagA）,应用无缝克隆技术构建原核表达载体PNZ8149-hpaA-cagA,电击转化乳酸球菌NZ3900（Lactococcus lactis,L.lactis）,构建以乳酸球菌为疫苗载体的原核表达系统NZ3900/PNZ81...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
幽门螺旋杆菌ureB基因PCR结果
M：DL2000 DNA Marker；1-6：ureB 基因 PCR 结果M：DL2000 DNA Marker；1-6：PCR results of ureB gene图2.2 脲酶显色试验结果Fig.2.2 Urease chromogenic test resultsA：阴性对照；B和C：培养所得菌落脲酶显色结果A：Negative control of Urease chromogenic test; B and C：Urease chromogenic testresults obtained by culture
（p＜0.001），除 AC 和 BC 之外的其他交互项的 P 值均大于 0.05，这提示它们的交互作用对幽门螺旋杆菌生长条件的筛选与优化不构成显著影响。模型的 F 值（53.54）表明该模型有统计学意义（p＜0.01），R-Squared（0.9817）和 Adj R-Square（0.9633）的数值表明该模型的拟合度较好，响应值的变化有超过 95％的可能性来源于所选变量。综合以上，该模型可以较好的描述各因素与响应值之间的真实关系，可以利用该模型的回归方程对本实验幽门螺旋杆菌在布氏血清培养基中培养基成分的优化与筛选情况进行准确分析与合理预测。为直观体现独立变量之间的交互作用及各独立变量与响应值之间的影响，响应面结果的 3D 图如图 2.4 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]幽门螺旋杆菌候选疫苗抗原的研究进展[J]. 赵翠,赵福广,黄利亚. 中国免疫学杂志. 2018(06)
[2]分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析[J]. 赵慧琳,季晓飞,张艳丽,柏雪莲,李娇娇,陈醒醒,张玉梅,李波清. 中国病原生物学杂志. 2016(11)
[3]响应面优化超声波辅助酶法提取小米蛋白工艺[J]. 杨桦,刘振春,刘想,崔晶蕾. 吉林农业大学学报. 2017(04)
[4]Serum Helicobacter pylori Kat A and Ahp C antibodies as novel biomarkers for gastric cancer[J]. Bing Zhang,Hai-Lin Li,Qing Fan,Fang Guo,Xi-Yun Ren,Hai-Bo Zhou,Ji-Wei Zhu,Ya-Shuang Zhao,Wen-Jing Tian. World Journal of Gastroenterology. 2016(21)
[5]响应面法优化蓝莓果渣可溶性膳食纤维提取工艺[J]. 杨桂霞,许晓娟,程志强,范海林,康立娟,何中秋. 吉林农业大学学报. 2015(06)
[6]幽门螺杆菌黏附素HpaA重组蛋白的表达、纯化及晶体生长[J]. 郭玲,章金勇,刘东,马博,王书峰,倪兵,李海波,刘威,吴玉章. 免疫学杂志. 2015(11)
[7]幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究（英文）[J]. 秦玉红,刘昆梅,廖国玲,杨华,徐广贤,李秀萍,郭乐. 中国生物工程杂志. 2014(12)
[8]短小芽胞杆菌Bacillus pumilus HR10增殖扩繁培养基组分优化[J]. 林司曦,吴小芹,丁晓磊,盛江梅. 微生物学杂志. 2014(06)
[9]Evaluating the immune responses of mice to subcutaneous immunization with Helicobacter pylori urease B subunit[J]. Peng Sun,Jia-Qi Wang,Yu-Tao Zhang,Sheng-Guo Zhao. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(02)
[10]Exploring alternative treatments for Helicobacter pylori infection[J]. Guadalupe Ayala,Wendy Itzel Escobedo-Hinojosa,Carlos Felipe de la Cruz-Herrera,Irma Romero. World Journal of Gastroenterology. 2014(06)
本文编号：3104114
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
幽门螺旋杆菌ureB基因PCR结果
M：DL2000 DNA Marker；1-6：ureB 基因 PCR 结果M：DL2000 DNA Marker；1-6：PCR results of ureB gene图2.2 脲酶显色试验结果Fig.2.2 Urease chromogenic test resultsA：阴性对照；B和C：培养所得菌落脲酶显色结果A：Negative control of Urease chromogenic test; B and C：Urease chromogenic testresults obtained by culture
（p＜0.001），除 AC 和 BC 之外的其他交互项的 P 值均大于 0.05，这提示它们的交互作用对幽门螺旋杆菌生长条件的筛选与优化不构成显著影响。模型的 F 值（53.54）表明该模型有统计学意义（p＜0.01），R-Squared（0.9817）和 Adj R-Square（0.9633）的数值表明该模型的拟合度较好，响应值的变化有超过 95％的可能性来源于所选变量。综合以上，该模型可以较好的描述各因素与响应值之间的真实关系，可以利用该模型的回归方程对本实验幽门螺旋杆菌在布氏血清培养基中培养基成分的优化与筛选情况进行准确分析与合理预测。为直观体现独立变量之间的交互作用及各独立变量与响应值之间的影响，响应面结果的 3D 图如图 2.4 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]幽门螺旋杆菌候选疫苗抗原的研究进展[J]. 赵翠,赵福广,黄利亚. 中国免疫学杂志. 2018(06)
[2]分子伴侣幽门螺杆菌Hsp60与UreB的相互作用分析[J]. 赵慧琳,季晓飞,张艳丽,柏雪莲,李娇娇,陈醒醒,张玉梅,李波清. 中国病原生物学杂志. 2016(11)
[3]响应面优化超声波辅助酶法提取小米蛋白工艺[J]. 杨桦,刘振春,刘想,崔晶蕾. 吉林农业大学学报. 2017(04)
[4]Serum Helicobacter pylori Kat A and Ahp C antibodies as novel biomarkers for gastric cancer[J]. Bing Zhang,Hai-Lin Li,Qing Fan,Fang Guo,Xi-Yun Ren,Hai-Bo Zhou,Ji-Wei Zhu,Ya-Shuang Zhao,Wen-Jing Tian. World Journal of Gastroenterology. 2016(21)
[5]响应面法优化蓝莓果渣可溶性膳食纤维提取工艺[J]. 杨桂霞,许晓娟,程志强,范海林,康立娟,何中秋. 吉林农业大学学报. 2015(06)
[6]幽门螺杆菌黏附素HpaA重组蛋白的表达、纯化及晶体生长[J]. 郭玲,章金勇,刘东,马博,王书峰,倪兵,李海波,刘威,吴玉章. 免疫学杂志. 2015(11)
[7]幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究（英文）[J]. 秦玉红,刘昆梅,廖国玲,杨华,徐广贤,李秀萍,郭乐. 中国生物工程杂志. 2014(12)
[8]短小芽胞杆菌Bacillus pumilus HR10增殖扩繁培养基组分优化[J]. 林司曦,吴小芹,丁晓磊,盛江梅. 微生物学杂志. 2014(06)
[9]Evaluating the immune responses of mice to subcutaneous immunization with Helicobacter pylori urease B subunit[J]. Peng Sun,Jia-Qi Wang,Yu-Tao Zhang,Sheng-Guo Zhao. Journal of Animal Science and Biotechnology. 2014(02)
[10]Exploring alternative treatments for Helicobacter pylori infection[J]. Guadalupe Ayala,Wendy Itzel Escobedo-Hinojosa,Carlos Felipe de la Cruz-Herrera,Irma Romero. World Journal of Gastroenterology. 2014(06)
本文编号：3104114
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