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环状RNA(circAMBRA1和circANKRD17)对Hela和OCM-1细胞增殖和转移的影响及其机制分析

发布时间:2021-04-01 03:58
  背景:作为非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)中的特殊成员,circRNA是一类天然存在的内源性环状RNA。CircRNA具有多种生物学功能,而作为ceRNA以竞争性结合microRNA的方式来参与转录后调控是其重要功能之一,它与多种疾病的发生和发展有关,包括神经和心血管系统疾病。目前较多的研究已经显示在不同的肿瘤中circRNA存在特异性表达,目前,有关circRNA的生物学功能的认识仍很肤浅,尚有大量的实验需要推进,对于circRNA的深入研究有望为临床应用中新型生物标志物或治疗靶标的发现提供理论依据。我们通过相关软件预测与PTEN有关的circRNA,发现circAMBRA1和circANKRD17可以与PTEN竞争性结合microRNA,然而circAMBRA1和circANKRD17至今尚未有报道。这两个circRNA分别来源于亲本基因AMBRA1和ANKRD17,主要形成于mRNA的剪接加工过程。AMBRA1是调控细胞凋亡和自噬的重要信号分子,对于体内衰老、损伤和坏死细胞的及时处理清除至关重要。同时维持机体的相对稳态,对免疫系统起着辅助性作用。有研究表明... 

【文章来源】:河南大学河南省

【文章页数】:91 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

环状RNA(circAMBRA1和circANKRD17)对Hela和OCM-1细胞增殖和转移的影响及其机制分析


3.1pGEM-T-easyvector载体质粒图谱

序列,位点,序列,首尾


图 2.1.3.2 circAMBRA1 和 circANKRD17 Junction site 测序结果峰图 (a)circAMBRA1 序列峰图比对结果:Junction site 表示 circAMBRA1 5’端与 3’端首尾相连的接头位点;(b)circANKRD17 序列峰图比对结果:Junction site 表示 circANKRD17 5’端与 3’端首尾相接的接头位点;2.1.4 不同细胞中 circAMBRA1 和 circANKRD17 表达水平检测

内源性,表达水平,处理组,检测结果


图 2.1.5 RT-qPCR 检测内源性 circAMBRA1 和 circAKRD17 在 RNase R 处理前后相对表达水平结果图(a)Hela 细胞中,RNase R 处理前后 circAMBRA1 及 AMBRA1 相对水平检测结果图:Hela-Mock 代表未处理组,Hela-RNase R 代表使用 RNase R 处理组,P<0.05,有统计学意义;(b)OCM-1 细胞中,RNase R 处理前后 circANKRD17 及 ANKRD17 相对水平检测结果图:OCM-1-Mock 代表未处理组,OCM-1-RNase代表使用 RNase R 处理组;2.2 PHB-circAMBRA1 和 PCD-circANKRD17 过表达重组质粒构


本文编号:3112648

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