光遗传调控SOCE通路诱导NFATcl与NFATc3活化在神经祖细胞分化调控中作用机制的研究

发布时间：2021-04-04 12:32

　　神经祖细胞（Neural Progenitor Cell,NPCs）是中枢神经系统（Central Nervous System,CNS）中一种特殊类型的专能干细胞,具有自我更新和定向分化为星型胶质细胞（Astrocyte,Ast）,少突胶质细胞（Oligodendrocyte,OL）和神经元（Neuron,Neo）的能力。NPCs不仅作为哺乳动物CNS发育早期的神经发生细胞,在成熟的CNS中,NPCs也可作为后备存储细胞,少量的储存在成体脑组织的特定区域内。当CNS受到损伤或疾病刺激而发生不可逆转的细胞死亡和缺失后,NPCs被重新激活,参与细胞和组织的损伤修复过程。基于这种特性,临床上已经应用体外培养的NPCs移植来治疗CNS损伤。然而,在自然分化的条件下,仅有约15%的NPCs向Neo分化,约10%的NPCs向OL分化,绝大部分约75%的NPCs向Ast方向分化。在这种不平衡的分化比例下,不仅过多Ast会形成胶质瘢痕而阻碍损伤的修复,Neo和OL分化比例过低也会严重限制神经功能的恢复。因此,如何诱导NPCs定向OL或者Neo分化目前NPCs研究领域中亟待解决的难题。研究发现NPCs... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

LeGO-iT2-IRES-tdTomato质粒图谱（#27343）；B.LeGO-iT2-mCh-rLOVsoc重组质粒

陆军军医大学硕士学位论文制：LeGO-iT2-mCh-rLOVsoc 质粒转染 NPCs 后，CCherry- LOV2404-546-rSTIM1336-486 蛋白，示意图如1 蛋白与 LOV2 蛋白融合而不发挥功能。在脉冲式蓝光刺激，40μW/mm2），诱导 LOV2 感光素发生构象改变TIM1 蛋白活化后与胞膜上的 Orai1 蛋白结合而形成 S

切后显示与原始质粒（阴性对照）相比，长度分别为 1227bp，848bp证质粒序列是否构建成功。测序起始显示 sgRNA 特异性序列成功构建到粒经过慢病毒包装后转染 NPCs，转 48 h 后，剩余细胞换新鲜培养基继测 NFATc1 与 NFATc3 蛋白的表达。P 0-3）SD 乳鼠，酒精消毒后断劲处掉皮肤，另一组镊子和箭头剖开露 PBS 溶液中，在解剖显微镜下剥除脑片反复研磨直至无明显组织块存在滤网过滤出细胞悬液，1500 rpm，离

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3118037