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IFN-α调控miR-214-5p/MFGE8通路对人脑血管外膜成纤维细胞增殖、凋亡的影响

发布时间:2021-04-07 09:11
  目的探讨干扰素α(IFN-α)调控miR-214-5p/乳脂肪球表皮生长因子8(MFGE8)通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖、凋亡的影响。方法将HBVAFs细胞分为NC组、IFN-α组、IFN-α+anti-miR-con组、IFN-α+anti-miR-214-5p组、IFN-α+pcDNA组、IFN-α+pcDNA-MFGE8组、IFN-α+anti-miR-214-5p+si-con组和IFN-α+anti-miR-214-5p+si-MFGE8组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-214-5p和MFGE8 mRNA的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印记(Western blot)法检测MFGE8、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blot法验证miR-214-5p和MFGE8的靶向调控关系。结果与NC组比较,IFN-α组HBVAFs细胞miR-214... 

【文章来源】:医学研究杂志. 2020,49(05)

【文章页数】:7 页

【文章目录】:
材料与方法
    1.材料与试剂:
    2.细胞分组和处理:
    3.qRT-PCR检测miR-214-5p和MFGE8 mRNA的表达水平:
    4.MTT法检测细胞活力:
    5.流式细胞术检测细胞凋亡:
    6.Western blot法检测MFGE8、Cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达:
    7.双荧光素酶报告基因实验验证miR-214-5p和MFGE8的靶向关系:
    8.统计学方法:
结 果
    1.IFN-α对人脑血管外膜成纤维细胞miR-214-5p和MFGE8表达的影响:
    2.干扰miR-214-5p促进IFN-α诱导人脑血管外膜成纤维细胞增殖:
    3.干扰miR-214-5p抑制IFN-α诱导人脑血管外膜成纤维细胞凋亡:
    4.miR-214-5p靶向调控MFGE8表达:
    5.过表达MFGE8促进IFN-α诱导的人脑血管外膜成纤维细胞增殖抑制细胞凋亡:
    6.干扰MFGE8部分反转anti-miR-214-5p对IFN-α诱导的人脑血管外膜成纤维细胞增殖和凋亡的作用:
讨 论


【参考文献】:
期刊论文
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本文编号:3123216

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