新型抗转铁蛋白受体抗体的构建表达及其体外生物学效应研究
发布时间：2021-04-14 12:07
【背景及目的】转铁蛋白受体（Transferrin Receptor,TfR）属于细胞膜Ⅱ型跨膜糖蛋白,与细胞铁摄取有关,影响细胞的生长和增殖。TfR在正常组织细胞中表达较低,而在肿瘤细胞表面表达增加,由于肿瘤细胞增长快速,需要合成更多DNA,核苷酸还原酶需要更多的辅因子铁,从而迫使肿瘤细胞上调TfR的表达。文献报道以及课题组前期研究证明,肿瘤细胞表面的TfR与转铁蛋白的亲和力是正常细胞的10100倍。同时,TfR的表达水平与肿瘤的分期和预后息息相关。TfR以其胞外段结合特性、内吞性和在人类肿瘤细胞病理学上的作用特点,作为肿瘤靶向显像和治疗的一个重要特异性标志备受关注。然而在肿瘤的靶向生物治疗中,如何获得高效、特异、稳定的抗体是有待解决的关键问题。本课题旨在前期构建抗TfR scFv和双价表达载体的基础上,进一步设计与构建新型抗TfR四价基因工程抗体（TfR-TeAb）,建立稳定表达细胞株,探索优化其真核表达与培养条件,以及探讨四价抗体的生物学效应,为其联合抗体依赖的效应细胞,如NK细胞治疗肿瘤研究奠定基础。【实验方法】1.基因扩增与表达载体的构建以本课题组前期构...
【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
表达质粒TfR-(scFv)
r2-VL-linker(1/2)基因片段. 2 Variable region of light bp/1500bp/1000bp/700bp/5inker2-VL-linker(1/2)PCR-BamHI 基因片段：为模板，通过 PCR 扩增， VH、酶切位点、保护碱基显示条带（图 3），PCR值相符。
er2-VL-linker(1/2)基因片段 ig. 2 Variable region of light c0bp/1500bp/1000bp/700bp/50-Linker2-VL-linker(1/2)PCR 产H-BamHI 基因片段：为模板，通过 PCR 扩增，p VH、酶切位点、保护碱基间显示条带（图 3），PCR 产论值相符。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤细胞铁代谢及其调节研究进展[J]. 王淑君,高冲,陈宝安. 癌症. 2010(04)
[2]Antigen-binding characteristics of AbCD71 and its inhibitory effect on PHA-induced lymphoproliferation[J]. Ping LEI~2,Yong HE~3,Qing YE~4,Hui-fen ZHU~2,Xiao-mei YUAN~2,Jing LIE~2,Wei XING~2,Sha WU~2,Wei DAI~2,Xin SHEN~2,Guo-bin WANG~(5,6),Guan-xin SHEN~(2,6)Departments of ~2 Immunology and Pharmacology,~3 Nuclear Medicine and ~5 Surgery,Union Hospital,Tongji Medical College,HuazhongUniversity of Science and Technology,Wuhan 430030,China;~4 Department of Pathobiology and Physiology,Medicine and Life ScienceCollege of Jianghan University,Wuhan 430056,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[3]转铁蛋白和转铁蛋白受体的研究进展[J]. 张宏伟,刘俊涛,王晓航. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 2000(04)
本文编号：3137290
【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
表达质粒TfR-(scFv)
r2-VL-linker(1/2)基因片段. 2 Variable region of light bp/1500bp/1000bp/700bp/5inker2-VL-linker(1/2)PCR-BamHI 基因片段：为模板，通过 PCR 扩增， VH、酶切位点、保护碱基显示条带（图 3），PCR值相符。
er2-VL-linker(1/2)基因片段 ig. 2 Variable region of light c0bp/1500bp/1000bp/700bp/50-Linker2-VL-linker(1/2)PCR 产H-BamHI 基因片段：为模板，通过 PCR 扩增，p VH、酶切位点、保护碱基间显示条带（图 3），PCR 产论值相符。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤细胞铁代谢及其调节研究进展[J]. 王淑君,高冲,陈宝安. 癌症. 2010(04)
[2]Antigen-binding characteristics of AbCD71 and its inhibitory effect on PHA-induced lymphoproliferation[J]. Ping LEI~2,Yong HE~3,Qing YE~4,Hui-fen ZHU~2,Xiao-mei YUAN~2,Jing LIE~2,Wei XING~2,Sha WU~2,Wei DAI~2,Xin SHEN~2,Guo-bin WANG~(5,6),Guan-xin SHEN~(2,6)Departments of ~2 Immunology and Pharmacology,~3 Nuclear Medicine and ~5 Surgery,Union Hospital,Tongji Medical College,HuazhongUniversity of Science and Technology,Wuhan 430030,China;~4 Department of Pathobiology and Physiology,Medicine and Life ScienceCollege of Jianghan University,Wuhan 430056,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[3]转铁蛋白和转铁蛋白受体的研究进展[J]. 张宏伟,刘俊涛,王晓航. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 2000(04)
本文编号：3137290
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