细胞自噬对犬骨髓间充质干细胞干性的影响
发布时间：2021-04-15 09:23
本研究旨在探讨细胞自噬对犬骨髓间充质干细胞（cBMSCs）干性的影响。分离培养cBMSCs,将其分为对照组、使用雷帕霉素促进细胞自噬的雷帕霉素组、使用3-MA抑制细胞自噬的3-MA组,于药物处理12、24、48 h后收集细胞,利用间接细胞免疫荧光法检测自噬微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC 3Ⅱ）的蛋白表达水平;荧光定量PCR检测自噬相关基因LC 3、Beclin 1、自噬相关基因7（Atg 7）以及干性相关基因性别决定基因相关转录因子2（Sox 2）、特异AT序列结合蛋白2（Satb 2） mRNA转录水平;通过茜素红染色检测经成骨诱导的cBMSCs的成骨分化能力,通过油红O染色检测经成脂诱导的cBMSCs的成脂分化能力。结果显示:雷帕霉素组的LC 3Ⅱ蛋白表达量上调,3-MA组则为下调。雷帕霉素组干性相关基因与自噬相关基因在不同时间点的表达水平均有不同程度的上调,且随感染时间的延长呈上调趋势;3-MA组干性相关基因与自噬相关基因的mRNA转录水平在不同时间点不同程度降低,且随感染时间延长呈下调趋势。成骨诱导试验中雷帕霉素组cBMSCs形态变化最明显,且矿化面积较大,3-MA组细胞矿化面积...
【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(02)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
成脂诱导试验(油红O染色,100×)
表1 荧光定量PCR引物序列Table 1 Realtime fluorescence quantitative PCR primers sequences 基因Genes 引物序列(5′→3′)Primer sequence 退火温度/℃Tm Beclin 1 F:GCTGCCGTTATATTGTTCTGR:TGCCTCCTGTGTCTTCAA 60 LC 3 F:CCTGTCCTGGATAAGACCAAGTTR:CTCCTGTTCATAGATGTCAGCGAT 60 Atg 7 F:TTGATGTGTTGGAGATTGGTR:AGGATTGGAGTAGGAGATATTG 60 Sox 2 F:AGTCTCCAAGCGACGAAAAAR:GCAAGAAGCCTCTCCTTGAA 60 Satb 2 F:CTTTGCAAGAGTGGCATTCAR:ATGCTCACATTGGGGTTCAT 60 GAPDH R: TGACACCCACTCTTCCACCTTCR:ATGAGGTCCACCACCCGGTTGCTGT 58图2 各组cBMSCs形态观察(400×)
各组cBMSCs形态观察(400×)
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖痛方对糖尿病神经病变大鼠坐骨神经自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ表达的影响[J]. 王明欣,田宇,朱晓云,王洪武,白文山,李鸣镝. 中国中医药信息杂志. 2019(09)
[2]淫羊藿苷干预磷酸钙骨水泥/骨髓间充质干细胞复合体修复兔股骨缺损[J]. 贾丙申,张熙明,于鹏,李明,李君,云大科,王晟,胡帅. 中国组织工程研究. 2019(30)
[3]神经修复中骨髓间充质干细胞的研究进展[J]. 王晗,李佳滨. 吉林医学. 2019(07)
[4]不同来源的间充质干细胞治疗骨与软骨组织疾病的研究进展[J]. 金镇雄,唐德志,肖延华. 中国骨质疏松杂志. 2019(06)
[5]骨髓间充质干细胞治疗心血管疾病机制的研究进展[J]. 尤云颖,袁向珍. 内蒙古医科大学学报. 2019(03)
[6]干细胞转录因子Sox2和Nanog在非小细胞肺癌中的表达及意义[J]. 王永芳,宋姗姗,张春芳,陈昊. 实用医学杂志. 2019(11)
[7]雷帕霉素激活自噬对钛颗粒诱导下骨髓间充质干细胞成骨能力的影响[J]. 刘强,陈曦,刘亦斌,李晓军,金群华. 宁夏医科大学学报. 2019(03)
[8]间充质干细胞干性维持及多向分化相关LncRNA的研究进展[J]. 罗金莲,余泽波,王静,李青,阙文君,胡雪,詹廷西. 重庆理工大学学报(自然科学). 2018(07)
[9]间充质干细胞治疗糖尿病足:问题与更好的应用[J]. 项杰,张劼. 中国组织工程研究. 2018(01)
[10]骨髓间充质干细胞移植修复皮肤创伤[J]. 张贝莹,罗冬章,麦海涛,陈祥浪,郭彦,王丙云,陈胜锋,陈志胜. 中国组织工程研究. 2017(29)
博士论文
[1]IL-37b基因修饰的骨髓间充质干细胞对DSS诱导的肠炎缓解作用的研究[D]. 王伟强.天津医科大学 2015
硕士论文
[1]自噬在雌激素缺乏骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞分化平衡中的作用研究[D]. 戚朦.第四军医大学 2015
[2]TNF-α、IFN-γ通过激活骨髓间充质干细胞NF-κB/STAT3通路调控DSS诱导小鼠肠炎的炎症反应[D]. 李娟.厦门大学 2014
本文编号：3139063
【文章来源】：畜牧兽医学报. 2020,51(02)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
成脂诱导试验(油红O染色,100×)
表1 荧光定量PCR引物序列Table 1 Realtime fluorescence quantitative PCR primers sequences 基因Genes 引物序列(5′→3′)Primer sequence 退火温度/℃Tm Beclin 1 F:GCTGCCGTTATATTGTTCTGR:TGCCTCCTGTGTCTTCAA 60 LC 3 F:CCTGTCCTGGATAAGACCAAGTTR:CTCCTGTTCATAGATGTCAGCGAT 60 Atg 7 F:TTGATGTGTTGGAGATTGGTR:AGGATTGGAGTAGGAGATATTG 60 Sox 2 F:AGTCTCCAAGCGACGAAAAAR:GCAAGAAGCCTCTCCTTGAA 60 Satb 2 F:CTTTGCAAGAGTGGCATTCAR:ATGCTCACATTGGGGTTCAT 60 GAPDH R: TGACACCCACTCTTCCACCTTCR:ATGAGGTCCACCACCCGGTTGCTGT 58图2 各组cBMSCs形态观察(400×)
各组cBMSCs形态观察(400×)
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖痛方对糖尿病神经病变大鼠坐骨神经自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ表达的影响[J]. 王明欣,田宇,朱晓云,王洪武,白文山,李鸣镝. 中国中医药信息杂志. 2019(09)
[2]淫羊藿苷干预磷酸钙骨水泥/骨髓间充质干细胞复合体修复兔股骨缺损[J]. 贾丙申,张熙明,于鹏,李明,李君,云大科,王晟,胡帅. 中国组织工程研究. 2019(30)
[3]神经修复中骨髓间充质干细胞的研究进展[J]. 王晗,李佳滨. 吉林医学. 2019(07)
[4]不同来源的间充质干细胞治疗骨与软骨组织疾病的研究进展[J]. 金镇雄,唐德志,肖延华. 中国骨质疏松杂志. 2019(06)
[5]骨髓间充质干细胞治疗心血管疾病机制的研究进展[J]. 尤云颖,袁向珍. 内蒙古医科大学学报. 2019(03)
[6]干细胞转录因子Sox2和Nanog在非小细胞肺癌中的表达及意义[J]. 王永芳,宋姗姗,张春芳,陈昊. 实用医学杂志. 2019(11)
[7]雷帕霉素激活自噬对钛颗粒诱导下骨髓间充质干细胞成骨能力的影响[J]. 刘强,陈曦,刘亦斌,李晓军,金群华. 宁夏医科大学学报. 2019(03)
[8]间充质干细胞干性维持及多向分化相关LncRNA的研究进展[J]. 罗金莲,余泽波,王静,李青,阙文君,胡雪,詹廷西. 重庆理工大学学报(自然科学). 2018(07)
[9]间充质干细胞治疗糖尿病足:问题与更好的应用[J]. 项杰,张劼. 中国组织工程研究. 2018(01)
[10]骨髓间充质干细胞移植修复皮肤创伤[J]. 张贝莹,罗冬章,麦海涛,陈祥浪,郭彦,王丙云,陈胜锋,陈志胜. 中国组织工程研究. 2017(29)
博士论文
[1]IL-37b基因修饰的骨髓间充质干细胞对DSS诱导的肠炎缓解作用的研究[D]. 王伟强.天津医科大学 2015
硕士论文
[1]自噬在雌激素缺乏骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞分化平衡中的作用研究[D]. 戚朦.第四军医大学 2015
[2]TNF-α、IFN-γ通过激活骨髓间充质干细胞NF-κB/STAT3通路调控DSS诱导小鼠肠炎的炎症反应[D]. 李娟.厦门大学 2014
本文编号：3139063
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