miR-124和miR-146a在MPTP帕金森病小鼠模型中的作用及其机制的研究
发布时间：2021-04-18 20:24
研究背景:帕金森病是临床上较为常见的神经退行性疾病。帕金森病的病因和发病机制较为复杂。其主要病理学特征是中脑黑质区致密部多巴胺能神经元的缺失和α-突触核蛋白堆积造成路易小体沉积,大多认为其与线粒体功能障碍、氧化损伤、神经炎症、细胞自噬障碍等有关。miRNA是高度保守的内源性非编码单链RNA,能够在转录水平抑制靶基因的表达,参与调节生长发育、炎症、凋亡等机体内几乎所有的生理病理过程。研究表明,多种miRNA在神经系统中表达丰富,其表达异常与帕金森病的发生发展密切相关,miR-124和miR-146a在神经系统中高度表达,在胶质瘤、脑脊髓炎和缺血性脑损伤等神经系统疾病中发挥着重要作用。但目前关于miR-124和miR-146a与帕金森病的相关性及其表达变化在帕金森病中的作用机制尚不清楚。第一部分miR-124和miR-146a在帕金森病小鼠模型及神经细胞中的表达目的:检测miR-124和miR-146a在帕金森病模型小鼠中脑组织及神经细胞中的表达。方法:腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）构建帕金森病模型小鼠。采用RT-PCR检测注射后不同时间点小鼠中脑组织中m...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
MPTP帕金森病模型小鼠中脑组织中miR-124和miR-146a的表达水平（A和B：分别为miR-124,miR-146a及内参U6进行qRT-PCR的扩增曲线和熔解曲线图；C和D：分别为miR-124和miR-146a的相对表达量；*，与对照组相比，P<0.05；#，与0d组相比，P<0.05；△，与1d组相比，P<0.05.）
19图 4.2 RNA 原位杂交检测 MPTP 帕金森病小鼠中脑多巴胺能神经元中 miR-124 和小胶质细胞中 miR-146a 的表达情况4.3 miR-124 和 miR-146a 在体外细胞中的表达MPP+是 MPTP 转化的具有毒性的活性成分，能够诱导 SH-SY5Y 细胞构建帕金森病细胞模型。而 LPS 是强烈的致炎性物质，能够诱导小胶质细胞激活病释放炎症因子，能够诱导小胶质细胞系 BV2 构建神经炎症模型。进一步探讨体外 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 和 LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-14的表达情况。采用 qRT-PCR 检测体外 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 和LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-146a 的表达，miR-124 和 miR-146a 的扩增曲线和熔解曲线分别如图 4.3 和 4.4 所示。分别以生理盐水处理组作为对照组，以U6snRNA 作为内参基因，对照组 miR-124 和 miR-146a 的表达水平均校正为 1各组细胞中 miR-124 和 miR-146a 的表达情况分别如图 4.5 和图 4.6 所示。结果
第一部分 miR-124 和 miR-146a 在 MPTP 帕金森病小鼠模型中的表达发现，与对照组相比，不同浓度 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 的表达水平均显著降低（P<0.05）；0.1mM 组中 miR-124 的表达水平为（0.764 0.045），而 5mM 组中 miR-124 的表达水平为(0.371 0.043)，miR-124 的表达水平随着MPP+浓度的增加而降低，但 0.5mM 组、1mM 组和 5mM 组中 miR-124 的表达明显低于对照组和 0.1mM 组，三组间无统计学差异（P>0.05）。而与对照组相比，不同浓度 LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-146a 的表达水平升高，但 lμg/ml LPS处理组中 miR-146a 的表达为（1.130 0.052），与对照组无统计学差异（P>0.05）；而 100μg/ml LPS 处理组中 miR-146a 的表达为（2.107 0.048），明显高于对照组和 lμg/ml LPS 处理组（P<0.05）。该结果表明，不同浓度的 MPP+处理后，SH-SY5Y 细胞中 miR-124 的表达明显降低，而不同浓度的 LPS 处理后，BV2 细胞中 miR-146a 的表达升高，进一步证实了体内的实验结果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MiR-146a在神经系统疾病中的作用及研究进展[J]. 薄纯锐,王丽华,王健健. 中国神经免疫学和神经病学杂志. 2017(06)
[2]细胞凋亡途径的研究进展[J]. 李帅,张炳东. 山东医药. 2017(37)
[3]帕金森病异常表达microRNAs的筛选及microRNA-1976作用机制的初步研究[J]. 邱峰,吴越,曹辉,华平,张尧,杜明洋,姜海波. 临床神经病学杂志. 2017(03)
[4]神经退行性疾病相关微RNA的研究进展[J]. 王琳琳,刘睿,张俊霞. 医学综述. 2017(06)
[5]微小RNA靶基因预测及功能分析方法综述[J]. 王志平,陈海魁,张湘宁,王巧玲,何志巍. 生物学通报. 2016(01)
[6]帕金森病遗传学的临床研究进展[J]. 常彦青,冯琛卓,刘俊平,汤颖. 中华神经科杂志. 2015 (03)
[7]MicroRNA在突触可塑性中的作用[J]. 胡雪玲,孙丽华. 中国医药导报. 2014(36)
[8]位于Hox基因簇的miRNA与亨廷顿病的发病机制有关[J]. 杨文欣. 中国病理生理杂志. 2014(06)
[9]帕金森病运动并发症发生机制的研究进展[J]. 熊念,孙圣刚. 中国现代神经疾病杂志. 2013(08)
[10]Progression of motor symptoms in Parkinson’s disease[J]. Ruiping Xia1,Zhi-Hong Mao2 1Department of Physical Therapy,School of Pharmacy and Health Professions,Creighton University,Omaha,Nebraska,USA 2Department of Electrical and Computer Engineering and Department of Bioengineering,University of Pittsburgh,Pittsburgh,Pennsylvania,USA. Neuroscience Bulletin. 2012(01)
博士论文
[1]pri-miR-146a单核苷酸多肽性降低miR-146a表达及与阿尔茨海默病发病相关研究[D]. 张斌.山东大学 2015
[2]神经炎症在帕金森病发病机制中的作用[D]. 方鑫.华中科技大学 2011
硕士论文
[1]调控帕金森疾病相关基因的miRNA研究[D]. 彭娟.南昌大学 2011
本文编号：3146117
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
MPTP帕金森病模型小鼠中脑组织中miR-124和miR-146a的表达水平（A和B：分别为miR-124,miR-146a及内参U6进行qRT-PCR的扩增曲线和熔解曲线图；C和D：分别为miR-124和miR-146a的相对表达量；*，与对照组相比，P<0.05；#，与0d组相比，P<0.05；△，与1d组相比，P<0.05.）
19图 4.2 RNA 原位杂交检测 MPTP 帕金森病小鼠中脑多巴胺能神经元中 miR-124 和小胶质细胞中 miR-146a 的表达情况4.3 miR-124 和 miR-146a 在体外细胞中的表达MPP+是 MPTP 转化的具有毒性的活性成分，能够诱导 SH-SY5Y 细胞构建帕金森病细胞模型。而 LPS 是强烈的致炎性物质，能够诱导小胶质细胞激活病释放炎症因子，能够诱导小胶质细胞系 BV2 构建神经炎症模型。进一步探讨体外 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 和 LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-14的表达情况。采用 qRT-PCR 检测体外 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 和LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-146a 的表达，miR-124 和 miR-146a 的扩增曲线和熔解曲线分别如图 4.3 和 4.4 所示。分别以生理盐水处理组作为对照组，以U6snRNA 作为内参基因，对照组 miR-124 和 miR-146a 的表达水平均校正为 1各组细胞中 miR-124 和 miR-146a 的表达情况分别如图 4.5 和图 4.6 所示。结果
第一部分 miR-124 和 miR-146a 在 MPTP 帕金森病小鼠模型中的表达发现，与对照组相比，不同浓度 MPP+处理的 SH-SY5Y 细胞中 miR-124 的表达水平均显著降低（P<0.05）；0.1mM 组中 miR-124 的表达水平为（0.764 0.045），而 5mM 组中 miR-124 的表达水平为(0.371 0.043)，miR-124 的表达水平随着MPP+浓度的增加而降低，但 0.5mM 组、1mM 组和 5mM 组中 miR-124 的表达明显低于对照组和 0.1mM 组，三组间无统计学差异（P>0.05）。而与对照组相比，不同浓度 LPS 处理的 BV2 细胞中 miR-146a 的表达水平升高，但 lμg/ml LPS处理组中 miR-146a 的表达为（1.130 0.052），与对照组无统计学差异（P>0.05）；而 100μg/ml LPS 处理组中 miR-146a 的表达为（2.107 0.048），明显高于对照组和 lμg/ml LPS 处理组（P<0.05）。该结果表明，不同浓度的 MPP+处理后，SH-SY5Y 细胞中 miR-124 的表达明显降低，而不同浓度的 LPS 处理后，BV2 细胞中 miR-146a 的表达升高，进一步证实了体内的实验结果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MiR-146a在神经系统疾病中的作用及研究进展[J]. 薄纯锐,王丽华,王健健. 中国神经免疫学和神经病学杂志. 2017(06)
[2]细胞凋亡途径的研究进展[J]. 李帅,张炳东. 山东医药. 2017(37)
[3]帕金森病异常表达microRNAs的筛选及microRNA-1976作用机制的初步研究[J]. 邱峰,吴越,曹辉,华平,张尧,杜明洋,姜海波. 临床神经病学杂志. 2017(03)
[4]神经退行性疾病相关微RNA的研究进展[J]. 王琳琳,刘睿,张俊霞. 医学综述. 2017(06)
[5]微小RNA靶基因预测及功能分析方法综述[J]. 王志平,陈海魁,张湘宁,王巧玲,何志巍. 生物学通报. 2016(01)
[6]帕金森病遗传学的临床研究进展[J]. 常彦青,冯琛卓,刘俊平,汤颖. 中华神经科杂志. 2015 (03)
[7]MicroRNA在突触可塑性中的作用[J]. 胡雪玲,孙丽华. 中国医药导报. 2014(36)
[8]位于Hox基因簇的miRNA与亨廷顿病的发病机制有关[J]. 杨文欣. 中国病理生理杂志. 2014(06)
[9]帕金森病运动并发症发生机制的研究进展[J]. 熊念,孙圣刚. 中国现代神经疾病杂志. 2013(08)
[10]Progression of motor symptoms in Parkinson’s disease[J]. Ruiping Xia1,Zhi-Hong Mao2 1Department of Physical Therapy,School of Pharmacy and Health Professions,Creighton University,Omaha,Nebraska,USA 2Department of Electrical and Computer Engineering and Department of Bioengineering,University of Pittsburgh,Pittsburgh,Pennsylvania,USA. Neuroscience Bulletin. 2012(01)
博士论文
[1]pri-miR-146a单核苷酸多肽性降低miR-146a表达及与阿尔茨海默病发病相关研究[D]. 张斌.山东大学 2015
[2]神经炎症在帕金森病发病机制中的作用[D]. 方鑫.华中科技大学 2011
硕士论文
[1]调控帕金森疾病相关基因的miRNA研究[D]. 彭娟.南昌大学 2011
本文编号：3146117
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