全反式维甲酸与VEGF联合应用诱导小鼠胚胎成纤维细胞定向成骨分化

发布时间：2021-04-24 00:22

　　目的研究全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,ATRA）与VEGF联合应用对于小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）定向成骨分化的影响。方法取NIH孕鼠（孕12～15 d）子宫内的胎鼠,去掉头、心、肝等器官后,采用胰蛋白酶消化贴壁法分离培养MEFs。利用HEK-293细胞采用反复冻融法扩增重组腺病毒红色荧光蛋白（recombinant adenovirus-red fluorescent protein,Ad-RFP）及Ad-VEGF。采用ALP染色和ALP定量检测法检测单独ATRA或VEGF以及ATRA和VEGF联合应用培养MEFs第3、5天ALP活性变化。将第3～4代MEFs分为A、B、C、D 4组,分别加入DMSO+Ad-RFP、ATRA、Ad-VEGF、ATRA+Ad-VEGF。实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR）检测第3、7天成骨相关标志物ALP、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白（osteopontin,OPN）、骨钙素（osteocalc... 

【文章来源】：中国修复重建外科杂志. 2020,34(02)北大核心CSCD

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本文编号：3156318