铜绿假单胞菌与轻型链球菌混合生物膜体外模型建立

发布时间：2017-04-21 10:16

  本文关键词：铜绿假单胞菌与轻型链球菌混合生物膜体外模型建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探索混合细菌生物膜(biofilm,BF)培养的适宜条件,建立混合细菌BF体外模型,并为研究混合细菌BF的调控机制奠定基础。方法分别培养铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株PA01、轻型链球菌(Strep tococcus mitis)标准株ATCC49456。紫外分光光度计、CCK-8 (cell counting kit-8)比色法比较两种细菌在不同pH值、培养基、混合比例、加入顺序和混合时间条件下的生长情况。建立单独及混合细菌BF后,荧光探针SYT09/PI标记,激光共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM)观察BF内部活死菌比例。扫描电镜(Scanning Electron Microscopy, SEM)观察BF结构。结果pH值为7.5最适宜两种细菌生长,P0.01；两种细菌在脑心浸出液培养基中生长明显优于胰大豆蛋白胨肉汤培养基,P0.01；PA01与S.mitis以1：3混合,且PA01优先加入,能形成较好的BF,P0.01；两种细菌混合的时机以PA01培养后立即混合S.mitis为优,P0.01。CLSM结果显示PA01可形成成熟致密的BF;S. mitis单独培养不形成BF。PAO1组与混合培养组BF厚度分别为(19.02±1.298)μ m和(28.76±3.472)μ m,P0.05。SEM显示混合细菌BF内两种细菌共存,结构更加致密立体。结论成功建立PA01混合S.mitis的BF体外模型,方法简便易行,结果可靠,重复性强。初步证实S.mitis可参与混合菌BF形成,并起促进作用。
【关键词】：铜绿假单胞菌 轻型链球菌 生物膜 模型
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R378
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10
• 1 仪器与材料10-11
• 2 方法11-14
• 3 结果14-21
• 4 讨论21-24
• 全文总结24-25
• 参考文献25-27
• 附图27-29
• 文献综述：细菌生物膜的体外模型29-48
• 参考文献34-48
• 致谢48-49
• 攻读硕士学位期间论文目录49

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本文编号：320124