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旋毛虫丝氨酸蛋白酶的表达与鉴定及用于免疫诊断的研究

发布时间:2021-06-05 13:07
  由旋毛虫引起的旋毛虫病是一种呈全球性分布的食源性人兽共患寄生虫病,主要是通过食用含有旋毛虫感染性幼虫的生的或者不熟的肉类所导致的。近年来在我国周边国家如韩国、泰国、老挝、越南等国也已发生了多次人体旋毛虫病暴发,因此,旋毛虫病作为了一种新现和再现的人兽共患疾病,对人体健康、社会、经济均造成了巨大的影响。目前,国内外对旋毛虫病的诊断主要集中在肌肉幼虫阶段的旋毛虫抗原。国际旋毛虫病委员会(ICT)建议旋毛虫肌幼虫ES抗原可作为诊断旋毛虫的金标准。然而,当旋毛虫肌幼虫ES抗原用于检测旋毛虫感染小鼠或猪的血清时,抗旋毛虫抗体IgG直到感染后3-4周才能检测到阳性;并且感染旋毛虫的病人在感染28天以后抗旋毛虫的抗体阳性率才能达到100%。因此,在旋毛虫感染后存在有23周的“窗口期”(window phase)。在旋毛虫的生活史中,肠道感染性幼虫(IIL)和成虫是旋毛虫对宿主肠黏膜的侵入期,其ES蛋白最早与肠黏膜直接接触并相互作用,能够接触宿主的免疫系统首先引起宿主的免疫应答;因此,IIL和成虫的排泄分泌抗原含有刺激宿主产生早期免疫应答的主要成分。在旋毛虫感染后的早期,最早出现... 

【文章来源】:郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】:131 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

旋毛虫丝氨酸蛋白酶的表达与鉴定及用于免疫诊断的研究


成虫ES成虫可溶和肌幼虫ES检测感染100条(A),500(B)条旋毛虫小鼠血清中抗旋毛虫抗体的阳性率

小鼠血清,抗体水平


图 1.2 成虫 ES(A),成虫可溶(B)和肌幼虫 ES(C)检测不同剂量旋毛虫感染小鼠血清抗体水平(----为 Cut-off 值)图 1.3 成虫 ES(A),成虫可溶(B)和肌幼虫 ES(C)检测不同剂量旋毛虫感染小鼠血清抗体阳性率

小鼠血清,包被,稀释度,浓度


图 1.3 成虫 ES(A),成虫可溶(B)和肌幼虫 ES(C)检测不同剂量旋毛虫感染小鼠血清抗体阳性率图 1.4 成虫 ES 抗原 ELISA 检测感染 100 条和感染 500 条旋毛虫肌幼虫 OD 值,虚线指的是 Cut-off 值,阴影部分指的是肌幼虫 ES 抗原不能检测到特异性抗旋毛虫抗体的区域2.5 检测旋毛虫和其他寄生虫染的病人血清中抗旋毛虫抗体水平2.5.1 棋盘滴定法检测蛋白的最佳包被浓度和血清的稀释度结果如下:成虫 ES 包被浓度 1.5μg/ml,成虫可溶的包被浓度 1.0μg/ml,肌幼虫 ES 包被浓度2.5μg/ml 血清稀释度为 1:200,二抗羊抗人 IgG 稀释度 1:5000 成虫 ES 的 Cut-off 0.41,成虫可溶的 Cut-off 0.47,肌幼虫 ES 的 Cut-off 0.45。

【参考文献】:
期刊论文
[1]云南省澜沧县一起旋毛虫病暴发的调查[J]. 王春泉,吴方伟,王兴荣,许海兵,李二,龙贵平,李树春,白美玲,黄艳,魏忠富.  中国热带医学. 2013(11)
[2]旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用的研究[J]. 王睿,王中全,崔晶.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2009(01)
[3]旋毛虫抗原基因Ts43原核表达及重组蛋白鉴定[J]. 任道锋,崔晶,王中全,韩化敏.  中国人兽共患病学报. 2008(06)
[4]小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化[J]. 王洁,崔晶,王中全.  中国病原生物学杂志. 2007(04)
[5]东方田鼠ADCC体外杀伤日本血吸虫童虫效果的初步观察[J]. 刘金明,傅志强,李浩,魏梅雄,林矫矫.  寄生虫与医学昆虫学报. 2001(04)



本文编号:3212227

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