SurA通过调控鞭毛表达影响伤寒沙门菌生物膜的形成
发布时间:2021-06-08 22:04
目的:研究周质伴侣蛋白SurA对伤寒沙门菌生物膜形成能力的影响及其潜在机制。方法:用前期构建的surA基因缺陷株、缺陷空载体株及缺陷回补株的生物膜实验,观察surA基因缺失对细菌生物膜形成能力的影响。通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测影响生物膜形成的几个关键基因在surA缺陷株及野生株中的表达差异,探索surA影响细菌生物膜形成的可能通路。通过电镜实验观察surA缺陷株及野生株的鞭毛表达情况。最后通过生物膜实验观察鞭毛缺失对生物膜形成的影响。结果:与野生株相比,surA缺陷株的生物膜形成能力显著下调,缺陷株里回补surA后,细菌的生物膜形成能力恢复到与野生株相当。与野生株相比,surA缺陷株中鞭毛相关基因的mRNA水平显著下调。电镜结果显示,与野生株相比,surA缺陷株的鞭毛表达数量显著减少。鞭毛缺失株(△flhD)几乎不形成生物膜。结论:伤寒沙门菌surA基因缺陷可能通过下调鞭毛基因表达来影响生物膜形成。
【文章来源】:南通大学学报(医学版). 2020,40(03)
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
伤寒沙门菌surA基因缺陷株的生物膜实验
为了探索周质伴侣蛋白SurA影响生物膜形成的机制,我们通过qRT-PCR检测影响伤寒沙门菌生物膜形成的几个胞外基质及关键调控子在野生株(WT)和缺陷株(△surA)中的表达水平。实验结果显示,与WT株相比,△surA菌株中鞭毛相关基因(flhD、fliA、fljB)的mRNA水平显著下调,其中flhD和fliB的mRNA水平下降为野生株的25%,fljA mRNA水平下降到野生株的10%(图2)。说明surA基因缺陷后下调伤寒沙门菌鞭毛表达。2.3 电镜观察surA基因缺陷对细菌鞭毛表达的影响
为观察伤寒沙门菌鞭毛和细菌生物膜形成能力的关系,利用鞭毛一级调控子FlhD的缺陷株进行生物膜实验。如图4所示,鞭毛缺失菌株(△flhD)的生物膜形成能力显著低于WT菌株;甚至低于△surA菌株的生物膜形成能力。考虑到我们已经证明伤寒沙门菌surA基因缺陷下调鞭毛相关基因表达,因此伤寒沙门菌surA基因缺陷可能通过下调鞭毛基因表达来影响生物膜形成。图4 鞭毛缺陷菌株的生物膜实验
【参考文献】:
期刊论文
[1]OsmY缺失对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的影响[J]. 孟彦辰,王菲,杜鸿,翁晓琴,张海方,生秀梅,徐顺高,黄新祥. 江苏大学学报(医学版). 2012(04)
本文编号:3219292
【文章来源】:南通大学学报(医学版). 2020,40(03)
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
伤寒沙门菌surA基因缺陷株的生物膜实验
为了探索周质伴侣蛋白SurA影响生物膜形成的机制,我们通过qRT-PCR检测影响伤寒沙门菌生物膜形成的几个胞外基质及关键调控子在野生株(WT)和缺陷株(△surA)中的表达水平。实验结果显示,与WT株相比,△surA菌株中鞭毛相关基因(flhD、fliA、fljB)的mRNA水平显著下调,其中flhD和fliB的mRNA水平下降为野生株的25%,fljA mRNA水平下降到野生株的10%(图2)。说明surA基因缺陷后下调伤寒沙门菌鞭毛表达。2.3 电镜观察surA基因缺陷对细菌鞭毛表达的影响
为观察伤寒沙门菌鞭毛和细菌生物膜形成能力的关系,利用鞭毛一级调控子FlhD的缺陷株进行生物膜实验。如图4所示,鞭毛缺失菌株(△flhD)的生物膜形成能力显著低于WT菌株;甚至低于△surA菌株的生物膜形成能力。考虑到我们已经证明伤寒沙门菌surA基因缺陷下调鞭毛相关基因表达,因此伤寒沙门菌surA基因缺陷可能通过下调鞭毛基因表达来影响生物膜形成。图4 鞭毛缺陷菌株的生物膜实验
【参考文献】:
期刊论文
[1]OsmY缺失对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的影响[J]. 孟彦辰,王菲,杜鸿,翁晓琴,张海方,生秀梅,徐顺高,黄新祥. 江苏大学学报(医学版). 2012(04)
本文编号:3219292
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