狂犬病病毒糖蛋白抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

发布时间：2021-06-13 16:45

　　目的建立可快速检测狂犬病病毒（rabies virus,RabV）糖蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并进行验证及初步应用。方法用抗RabV糖蛋白基因工程抗体建立双抗体夹心ELISA法,检测RabV糖蛋白抗原含量。对建立的方法进行特异性、线性、准确性、板内与板间精密性、灵敏度验证,对不同厂家（毒株分别为aG、PV、CTN、PM）生产的狂犬病疫苗与不同工艺阶段的狂犬病疫苗样品进行适用性检测。结果捕获抗体与酶标抗体最佳稀释度分别为1∶2 000和1∶4 000,最佳封闭剂为1. 5%BSA。该方法与其他人用疫苗和辅料成分无交叉反应;线性范围在0. 003 2～0. 103 1 IU/mL之间,R2> 0. 98;准确性验证的回收率在97. 0%～110. 1%之间;精密性验证的板内变异系数<8. 6%,板间变异系数<13. 9%;检测不同厂家的狂犬病疫苗和不同工艺阶段的疫苗样品呈良好的剂量依赖效应。结论建立了适用于人用狂犬病疫苗糖蛋白抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法,符合定量检测的需求,可用于aG、PV、CTN、PM等不同毒株生产的狂犬病疫苗检测;也可用于病毒... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020,33(04)CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

线性回归验证

回归方程为y=1.219 8 x+2.460 5,R2=0.986 9。抗原稀释倍数的对数与A450值的对数呈良好的线性关系，线性范围在0.001 6～0.206 3 IU/mL之间，见图2。图2 线性回归验证

建立的方法检测不同生产毒株狂犬病疫苗糖蛋白抗原含量的曲线趋势基本一致，A450值与疫苗稀释度呈良好的剂量依赖效应，见图3。2.3.2 不同疫苗工艺阶段样品的检测

【参考文献】：
期刊论文
[1]人用狂犬病疫苗中糖蛋白抗原检测方法的建立及适用性研究[J]. 曹守春,张全福,王云鹏,刘洋,李阿茜,李川,孙丽娜,梁米芳.  中华实验和临床病毒学杂志. 2016 (06)



本文编号：3227920