小鼠骨髓间充质干细胞的稳定高效培养及外泌体的提取

发布时间：2021-07-03 15:12

　　目的建立稳定、高效的骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）培养及外泌体提取方法。方法通过全骨髓、差速贴壁并辅助以低氧（5%O₂）环境的方法进行小鼠BM-MSCs培养,收集细胞,鉴定干细胞表面标志物,进行成骨、成脂及成软骨诱导;并收集上清液,超速分离的方法提取外泌体后鉴定。结果小鼠BM-MSCs生长状态好,第3代细胞就可达到95%以上的纯度且可稳定传代至15代左右,表达间充质干细胞（MSCs）标志物,且可被成功诱导分化成骨、成脂肪及软骨组织。超速离心得到的细胞外囊泡具有典型外泌体样结构,Western blot鉴定显示具有外泌体特征性蛋白标志物。结论全骨髓培养方法使得小鼠BM-MSCs的损失最少,低氧（5%O₂）环境下的差速贴壁法使得小鼠BM-MSCs增殖速度快,纯度高。该方法培养的小鼠BM-MSCs可稳定分泌外泌体囊泡,为小鼠MSCs的培养及其外泌体获取提供了良好的方法。 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(04)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

小鼠BM-MSCs外泌体的提取与鉴定

小鼠BM-MSCs培养及传代 ×200

流式细胞术鉴定BM-MSCs表面标志物

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3262826